PCR (Polymerase Chain Reaction) (주형 DNA,Primer,dNTP,Tris-Hcl,전기영동)

최초 등록일
2016.02.10
최종 저작일
2016.02
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소개글

PCR 실험시 발표한 자료입니다.

목차

1. PCR의 목적
2. PCR의 원리
3. PCR의 과정
4. PCR의 결과 확인
5. PCR의 오염
6. PCR의 사용 분야

본문내용

Primer
PCR의 가장 중요한 요소, 정확도 결정
조건 : 주형 사슬에 상보적
- Primer의 3’end가 주형사슬과 마주보는 방향으로 위치
길이 : PCR의 효율과 관련 17~30mer 정도가 적당

<중 략>

PCR의 과정
주형 DNA 변성 (Denaturation)
DNA Primer 결합 (Annealing)
상보 DNA 합성 (Extention)
새로운 이중가닥 DNA 변성
PCR 반응 반복
PCR 산물 확인 및 정제

<중 략>

PCR 과정의 온도
변성 온도 : 94℃
- 보통 90 ~ 96℃에서 30~60초
(첫 cycle의 변성은 확실한 변성을 위해 약 5분간 진행)
프라이머 결합온도 : 40 ~ 65℃
- 보통 40 ~ 65℃에서 30~60초
합성 온도 : 70 ~ 74℃
- 때에 따라 시간을 연장시키는 것이 좋다.
(PCR산물의 크기가 크거나 반응요소의 농도가 낮을때)

참고 자료

없음

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