DNA ligase란

목차

1. 서론 ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­
(1) DNA ligase란

2. 본론 ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­
(1) DNA ligase 종류
1) Bacteriophage T4 DNA ligase
2) E. coil DNA ligase
(2) DNA ligase의 작용기작
(3) DNA ligation
1) ligation이란?
2) Cohesive end ligation
3) Blunt end ligation

3. 결론

본문내용

1. 서론
(1) DNA ligase란
DNA 연결효소, 폴리뉴클레오티드리가아제라고도 한다. 잘려진 DNA를 이어주는 enzyme.
한쪽은 5'-phospate termini 다른 한쪽은 3'-hydroxy termini 인 곳을 이어서 phosphodiesterbond backbone 을 형성한다. 효소반응에서는 Mg2+＋를 요구하며, 파지의 리가아제는 ATP를, 박테리아의 리가아제는 DPN(디포스포피리딘뉴클레오티드)을 필요로 한다. ATP와 DPN은 아데닌산과 효소복합체 형성에 이용된다. 복합체의 합성이 제1단계 반응이며, 제2단계에서는 이 복합체와 DNA가 반응하여 DNA에 포스포디에스테르 결합을 형성해 AMP를 방출한다. 효소＋DPN(ATP)­78효소·AMP＋NMN(PPi) 효소·AMP＋DNA­78DNA(연결)＋효소＋AMP 이 효소는 동물세포에서도 발견되며, 생체 내에서는 DNA복제, DNA수복(修復)에 관여하고 있다.
일반적으로는 ATP(아데노신3인산) 또는 이와 유사한 물질에서 인산기(PO₄)를 떼어내고, 이 때 발생하는 에너지를 이용하여 서로 다른 두 분자간의 새로운 화학결합을 형성하는 반응을 촉진하는 효소들을 의미한다. 이 외에도 리가아제는 결합의 역반응인 고에너지인산화합물의 분해에 의한 ATP생산과정에도 참가한다.
DNA ligase는 대장균의 균체 내에도 존재하나 T4 phage가 생산하는 ligase가 강력하여 보통 이것을 사용한다. 이 효소는 DNA의 절단점이 3`-OH말단과 5‘-인산 말단으로 인접되어 있는 경우 이를 연결한다. DNA를 제한효소로 절단하면 5’말단에 인산이 노출되고 3‘말단에는 -OH기가 노출되는데 그러한 단편은 ligase에 의해 결합이 가능하다.
유전자 재조합 과정에 사용되는 ligase는 주로 DNA ligase이며 이 효소는 원핵세포, 진핵세포, 바이러스 등에서 유래한 것이 있는데, 현재 많이 사용되는ligase는 T4 DNA ligase와 E. coli DNA ligase이다.

참고 자료

없음