SDS PAGE

소개글

SDS PAGE 원리, 재료, 과정, 결과, 토의 등을 작성했습니다.

목차

▶▶PURPOSE
▶▶PRINCIPLE
▶▶MATERIALS
▶▶PROCEDURE
▶▶Result:
▶▶Discussion

본문내용

▶▶PURPOSE
SDS를 이용하여 단백질들을 젤 위에서 전기영동 시킴으로 단백질들의 순수한 크기를 알 수 있다.

▶▶PRINCIPLE
단백질과 SDS를 함께 넣어주면 아미노산 두 개에 SDS 한 개가 결합하는 정도로 비율을 보이기 때문에 단백질 자체의 전하 등은 가려지고 음전하만 띄게 해주며 단백질을 일차구조로 바꾸어준다. 그러므로 이 단백질들을 polyacrylamide gel에 넣어주고 전기 영동을 시키면 이온들은 (+)쪽으로 이동하게 된다. 이 때 분자량이 작은 단백질일수록 gel에 걸림 없이 더
빨리 이동할 수 있다. 즉 단백질 분자의 전하량, 분자의 크기에 따라 이동하는 속도가 다른 점을 이용하여 단백질을 분리, 분석할 수 있다.

▶▶PROCEDURE
1) Seperating solution 만든다.(이때 TMED와 APS는 마지막에 넣는다(굳혀주는 역할)
2) Gel을 파이펫으로 두장의 우리사이로 채워준다.
3) 그 위를 20-30분 동안 DDW로 채운다: 젤을 눌러주는 역할(표면 장력 때문에 gel의 모양을 일직선으로 하기 위해)
4) DDW를 티슈로 빨아들이고 stacking gel solution을 넣는다.
5) Comb를 꽂는다.
6) 굳으면 comb를 빼고 container에 넣고 tank buffer를 채우면 된다

참고 자료

없음