SDS-PAGE (단백질 전기영동)
- 최초 등록일
- 2010.06.02
- 최종 저작일
- 2010.05
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소개글
단백질 전기영동 실험보고서입니다.
예비보고서 아니구요, 실험 다 마치고 쓴 보고서입니다`ㅁ`
이론적인 내용들도 많이 찾아서 적었구요,
중간중간 분자구조들도 찾아서 적어두었습니다.
목차
1. 실험제목:
2. 실험년월일:
3. 이름
4. 실험목적
5. 이론
1) 단백질의 전기영동
2) SDS-PAGE
3) staining & destaining
4) Western blot
6. 실험기구 및 시료
7. 실험 방법
8. 실험결과 및 토의
9. References
본문내용
4. 실험목적
: 저번시간에 분리한 단백질을 이용해서 SDS-PAGE를 이용하여 단백질을 관찰한다.
5. 이론
1) 단백질의 전기영동
① 단백질 전기영동과 그 목적
-단백질의 전기영동은 단백질의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법으로 단백질의 정성적인 분석으로 SDS-PAGE 즉 SDA와 Polyacrylamide를 사용한 전기영동을 사용한다.
-단백질의 전기영동의 목적은 원하는 단백질의 유무를 확인하고 단백질의 분리 정도를 확인, 분자량을 이미 알고 있는 단백질과 비교하여 분자량을 산출하기 위함이다.
② 전기영동 buffer선택
- TAE (Tris-acetate, EDTA): DNA agarose전기영동시 주로 사용하고 분자량이 큰 경우 사용한다.
-TBE (Tris-borate,EDTA) : DNA분자량이 작은 경우, 염기서열 분석시 사용하고 RNA전기영동시 사용한다.
-SDS-PAGE Running Buffer: 주로 단백질을 크기별로 분리시 SDA-PAGE를 할 때 사용하고 Glycine에 의해 크기별 분리가 가능하다. SDS에의해 단백질의 변성된 형태로 이동 유지한다.
③ 전기영동시 Gel의 선택
- Gel의 종류에 따라 달라진다.
Agarose gel: 분자량이 100bp~ 20kbp, 해상력이 낮다.
Polyacrylamide gel(PAGE):분자량이 작을 때 (10bp~1000bp) 사용한다.
-핵산의 denaturation에 따라서 선택
DNA: non-denaturation gel, 염기서열 분석시 denaturing gel을 사용하기도 한다.
RNA: Denaturing gel (Alkaline, formaldehyde, Urea등 첨가)
-분리하고자 하는 물질에 따라서 선택
DNA: Agarose gel, PAGE
RNA: Formaldehyde agarose gel
참고 자료
없음