생화학 실험 단백질 ( 효소 ) 의 정제 및 정량 목차 실험 날짜 실험 제목 및 목적 3. 개요 – 이론 및 실험 원리 4. 실험재료 및 방법 5. 실험결과 6. 고찰 7. 참고문헌 1. 실험 날짜 2014 년 5 월 28 일 수요일 날씨 : 맑음 온도 : 평균기온 2..
실험 제목 및 목적 재조합 플라스미드 DNA 의 분리 및 lac Z 유전자의 확인 단백질 연구를 위한 세포의 조추출액의 제조 실험 목적 ① 목적유전자 lac Z(B- galactosidase ... 생화학 실험 재조합 플라스미드 DNA 의 분리 및 lac Z 유전자의 확인 단백질 연구를 위한 세포의 조추출액의 제조 목차 실험 날짜 실험 제목 및 목적 3. ... 유전자 ) 가 포함된 plasmid 가 들어가있는 형질전환된 균주의 plasmid DNA 를 분리하고 , 제한효소를 사용해 lac Z 유전자를 확인한다 . ② 단백질 연구를 위해
Lac Operon 이란 Lac Operon 은 락토스(젖당) 대사에 관여하는3 개의 효소인 Lac Z (베타갈락토시다아제; 베타갈락토스 가수분해효소; 젖당분해효소), Lac Y ( ... Z.A.Y 로 구성되어있으며 각각 β-갈락토시다아제, Hyperlink "http://terms.naver.com/entry.nhn? ... 베타갈락토시드퍼미아제; 세포내 젖당이동 세포막 단백질), Lac A (베타갈락토시드트랜스아세틸라아제) 인 3개의 Lac.
대장균의 lac operon은 lac I, P, O, Z, Y, A (i, p, o, z, y, a) 유전자 순으로 오페론을 형성하고 있으며, 구조유전자(z, y, a)와 조절유전자 ... Lactose는 Lac Z로부터 발현되는 β-galactosidase에 의해 glucose와 galactose로 가수분해되기 때문에 일반 세포에서는 Ferritin의 발현정도에는 한계가 ... 방해되어 세 가지 효소의 구조유전자 z, y, a 의 전사가PTG 용액에 300 μL의 식염수를 더 넣어 두 sample의 OD를 맞춰주었다. 2.
강하게 결합하여 lac Z로부터의 beta -galactosidase 발현을 억제한다. ... 젖당이 없는 환경에선 Operator에 억제 단백질이 붙어 lac Z의 단백질 발현을 억제한다.Figure 13. ... S structure gene의 구성lac Z beta -galactosidase(젖당분해효소)를 발현한다. lac Y beta -galactoside permease(젖당을 세포
되지 않은 pBS-SK(+)는 lac Z가 정상적으로 작용하고 재조합된 pBS-SK(+)-DXS는 lac Z가 손상되어 작용하지 않는다. ... 반면 재조합된 DNA을 가진 대장균은 lac Z 자리에 대신 DXS가 들어가면서 손상되어 X-gal을 분해하지 못하므로 흰색을 나타낸다. ... 실험에서는 α - 상보성 원리가 일어났는지 여부를 발색 기질을 이용해 균체의 색으로 판단한다. lac Z에서 lactose를 분해하는 β-galactosidase를 분비하는데 재조합
그러나 Lac Z 갖고 있는 플라스미드의 Lac Z에 다른 유전자가 들어가면 β-galactosidase가 활성 되지 않으므로 하얀색 colony를 나타나게 됩니다 9)Multiple ... Lactose는 allolactose로 변화하고, 이는 다시 lac 억제 인자와 결합하여 lac 억제인자는 불활성화된다. ... 이를 통해 형질 전환 기술을 익히고, Lac Operon의 mechanism을 이해한다. 4.
이는 lac operon이 작동하여 lac Z가 발현됨에 의해 ONPG가 분해되었다는 것을 의미한다. opera ... Z buffer의 역할은 pH 유지로 알려져있다. LB 1ml을 llet이 같이 딸려오지 않도록 주의하고 을 측정하여 ONPG분해정도를 분석한다. ... 이때 동안은 lac operon의 전사는 억제되어 있으나 포도당이 다 이용되면 lac operon의 전사가 시작되어 β-galactosidase가 발현하여 젖당을 .
IPTG가 없는 경우, lac I에 의해 발현되는 repressor가 operator에 binding하여, RNAP(RNA polymerase)가 lac Z,Y gene를 발현시키기 ... operon에 의해 조절되는 protein의 발현을 위해 lactose 대신 넣어주는 물질로서 Lactose는 Lac Z에 의해 발현되는β-galactosidase에 의해 분해되지만 ... IPTG가 있는 경우, IPTG와 binding한 repressor는 그 형태가 바뀌어, operator에 binding하지 못하게 되고, lac Z,Y gene이 정상발현 되게 된다
즉, X-gal은 Lac z 유전자가 있을 때 반응해 파란색이 나타난다. ... 파랗게 나타난 것 이 경우 추측대로 Lac z가 X-gal과 반응해 파란색으로 나타난 것이다. ... 만약 플라스미드에 Lac z 유전자를 빼고 다른 유전자를 끼워넣는다면 X-gal의 반응은 일어나지 않게 되어, 균이 하얀색으로 관찰될 것이다.
최종적으로 젖당 이용에 필요한 lac Z, lac Y 그리고 lac A 단백질 발현을 결정하게 되는 것이다. ... 젖당 유 포도당 무 : CAP 결합 (o, x) lac1 결합 (o, x) 2. 젖당 유 포도당 유 : CAP 결합 (o, x) lac1 결합 (o, x) 3. ... 젖당 무 포도당 유 : CAP 결합 (o, x) lac1 결합 (o, x) 4. 젖당 무 포도당 무 : CAP 결합 (o, x) lac1 결합 (o, x) 2.
Z와 같거나, lac Z와 반대 방향일 수 있다. omp A가 반대로 삽입된다면 이상한 sequence를 가지는 단백질이 만들어질 수도 있다. ... 그렇지만 목적하지 않은 다른 유전자가 들어가서 lac z 유전자가 깨졌으면, 프라이머가 달라붙을 유전자가 없으므로 증폭되지 않는다. ... White colony는 목적한 인서트가 제대로 들어갔거나, 다른 DNA fragment가 인서트로 들어가서 lac z 유전자가 깨졌을 때 나오는 것이다.
또한 lac 오페론에 있는 B-galactocidase 효소를 만드는 유전자인 lac Z 유전자가 있다. Insert DNA가 들어가면 lac Z가 갈라지게 된다. ... 블루 콜로니는 self ligation된 vector가 삽입된 transforment이고 화이트 콜로니는 lac z 유전자가 깨진 상태에서 x-gal 분해가 되지 않은 상태, 즉 목적한
[Figure 1.]을 확인해 보면 pGEM-T Vector에는 결합자리 바로 윗부분에 lac Z 유전자가 발현되는 부분이 있는데, insert와 vector이 결합하게 되면 lac ... Competent cell에 transformation이 되지 않으면 lac Z 유전자가 β-galactosidase를 정상적으로 발현시켜 X-gal을 분해하여 색이 파란색으로 변하게 ... 반면에 Competent cell에 정상적으로 transformation이 되었다면 이는 lac Z를 손상시켜 β-galactosidase가 발현되지 않아 X-gal을 분해하지 못한다
그는 promotor(아래 그림의 P), 작동유전자(O), 구조유전자군(Z, T, A)으로 이루어져 있으며 promotor에 RNA polymerase가 결합되면, DNA 전사가 시작된다 ... 단백질의 발현을 이해하기 위해서는 lac-operon에 대해 알아야 한다. lac-operon이란 유전자 발현 조절 시스템으로써, 단백질의 발현을 조절한다. lac-operon에서 ... 이로써 lac-operon의 전사가 개시된다. IPTG는 0.1에서 1.0mM 정도의 농도에서 효과적인 inducer이다.
Lac l, CAP, P, O가 regulation을 담당하는 부분이고 lac zlac y lac A가 대사에 필요한 ENZYME 코딩에 대한 정보가 담겨있는 structure부분이다 ... Lac operon의 구조는 위의 사진과 같다. ... Lac operon Lac operon은 structure DNA가 lactose대사 enzyme에 대한 정보를 담고 있는 E.COLI의 operon이다.
Z 유전자pBR322 4361bp인 이중가닥 DNA 벡터 rep(pMB1 유래의 복제원점), rop(사본수 조절)AmpR(bla) ,TetR 박테리아 세포 하나 당 사본 수가 15 ... 클로닝 및 발현 벡터 플라스미드 종류 F플라스미드 R 플라스미드 Col 플라스미드 분해성 플라스미드 독성 플라스미드 1) 플라스미드 벡터 →복제 원점, 항생제 저항 유전자, MCS, lac
