[생물화학공학및실험 A+] Liquid culture & Expression

소개글

[생물화학공학및실험] 다섯번째 실험입니다.
[Liquid culture & Expression]
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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

이번 실험의 목표는 액체배지를 이용하여 유전자 조작된 균을 배양한 후, 원하는 특정 단백질이 발현되는지 확인하는 실험이다. 본 실험에 사용한 균은 형질 전환(Transformation)을 통해 eGFP 유전자가 재조합 된 pET-22b(+) plasmid DNA를 포함하는 E. Coli 계열의 BL-21(DE3)이며, 오페론(Operon) : 조절 유전자, 작동 유전자, 프로모터, 구조 유전자 등을 포함한 단백질 합성에 관여하는 일련의 DNA 구성. 본 실험에서는 Lac Operon 구조가 관찰된다.
오페론(Operon) 구조를 갖기 때문에 IPTG 물질을 Inducer로 사용하여 eGFP 유전자 발현을 가능케 하였다. 결과적으로 UV transilluminator를 이용하여 액체 배지를 조사하였을 때 IPTG가 첨가된 액체 배지에서 형광색을 띠는 것을 확인할 수 있었고 eGFP 유전자가 정상적으로 발현되었음을 확인할 수 있었다. 마지막으로 본 실험에서 OD(Optical Density)와 관련된 세포 성장 곡선과 오페론의 전반적인 메커니즘에 대해 서술하였다.

참고 자료

김수기 外 14名, 2006, “산업․응용 미생물학”, 라이프사이언스, page 26~29.
pET-22b(+) vector Protocol.
https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=soni0330 ‘IPTG induction(Lac operon expression)’