plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동 A

소개글

"plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Abstract
Ⅱ. Introduction
III. Materials & Methods
Ⅳ. Results
Ⅴ. Discussion
Ⅵ. Reference

본문내용

Ⅰ. Abstract
이번 실험에서는plasmid DNA인 pUC4K를 절단하는1ulBamH1을 이용한 Cut과BamH1이 없는 uncut인pUC4K의 크기를1퍼센트의 아가로스겔에서 전기 영동을 통해 확인할 수 있다.전기 영동을 진행하면1XTAE buffer에서 진행하는데 크기가 큰 것은 아가로스겔의 그물 구조를 통과하는데 어렵기 때문에 well근처에 존재하고,DNA의 크기가 작을수록 멀리 이동하는 특징을 이용해 실험을 진행하였다.이때 UV를 이용하면,redsafe가 DNA의 염기 쌍에 염색되어 관찰할 수 잇고, 다양한 크기의 DNA가 있어 실험한 DNA의 크기를 알 수 있도록하는 ladder을 통해 cut과 uncut의 DNA 조각의 크기를 알 수 있다.하지만 실험결과 cut과 uncut의 DNA크기가 같게 나와 오차가 발생했다.이때 오차 원인으로는 다양한 요인이 존재하지만 그중에서 BamH1의 변성으로인해 제기능을 못하였다.이론상의 실험결과에서는 cut이 uncut보다 작은 조각을 확인할 수 있었고, 2702,1264bp에서 조각이 있음을 통해서 BamH1인 제한효소가 DNA를 잘랏음을 확인할 수 있다.이때 gel 농도를 올려주면 그물이 촘촘하여 더 작은 단위의 DNA를 관찰할 수 있고 gel농도를 내려주면 그물이 느슨해 큰 단위의 DNA를 분리하는데 유리함을 알 수 있다.또 BamH1이 아닌 다른 제한효소를 사용하였을 경우 pUC4K map에서 DNA의 조각의 크기를 알 수 있다.

참고 자료

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