일반생물학및실험 Plasmid DNA 분리
- 최초 등록일
- 2021.06.06
- 최종 저작일
- 2020.09
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목차
Ⅰ. 실험목적
Ⅱ. 배경지식
Ⅲ. 가설설정
Ⅳ. 실험방법
Ⅴ. 결과
Ⅵ. 고찰
Ⅶ. 참고문헌
본문내용
Ⅰ. 실험목적
Plasmid DNA 분리 실험을 통해 gene cloning 원리를 이해한다.
Ⅱ. 배경지식
1. Plasmid DNA
1-1. Plasmid DNA
생장에 필수적인 염색체 DNA에서 물리적으로 분리되어 있는 대표적은 에피솜 DNA 분자를 이른다. 1952년 미국의 유전학자 J. 레더버그가 최초로 플라스미드를 세균의 염색체 이외의 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자라는 의미로 명명하였다. 세포내에서 세대를 통하여 안정하게 자손에게 유지된다. 전달됨에도 불구하고 염색체와는 별개로 존재하며 자율적으로 증식하는 유전자의 총칭이다. 일반적으로 그 유전자는 세포의 생존에 있어서 필수적인 것은 아니지만 특정 환경에 생존하는데 필요한 소수의 유전자를 보유한다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자 삽입을 하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다.
1-2. pET-41a(+) DNA와 구성요소
1) T7 promoter : 박테리오파지 T7의 promoter sequence. RNA 중합효소들과 강한 친화력을 가지므로 다음 유전자를 강하게 발현시키며 이 경우 카나마이신 저항성 유전자의 발현을 위해 포함 된다.
2) T7 plyA : T7 아데닐산중합반응 신호이다. 전사 과정을 종료하고 ply A tail을 붙이는 역할을 한다.
참고 자료
네이버 지식백과] 플라스미드 [plasmid] (미생물학백과 )
[네이버 지식백과] 플라스미드 [plasmid] (생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 강영희)
[네이버 지식백과] 플라스미드 [plasmid] (두산백과)
pET-41a(+) DNA vector map, https://www.snapgene.com/
Cloning vector의 구성요소 : pET-41a(+) vector를 예로, https://blog.naver.com/underheaven/
140078600538
[네이버 지식백과] DNA 추출 [DNA extraction] (미생물학백과 )
플라스미드(Plasmid) DNA 분리 – 원리(Principle)와 방법(Methods), https://blog.naver.com/nan
ohelix/70180385720
DNA 농도 및 순도 측정, http://blog.naver.com/nanohelix/70179162449
식품의약품안전처, https://www.foodsafetykorea.go.kr/foodcode/01_03.jsp?idx=777
KOREA SCIENTIFICS, 전기영동의 원리와 실험
[네이버 지식백과] DNA 재조합 기술 [recombinant DNA technique] (동물학백과)