미생물 DNA 추출 실험 - A+ 보고서

소개글

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목차

1. 실험목적
2. 실험방법
3. 결과
4. 고찰
5. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
생명체가 살아가는데 필요한 모든 유전정보를 담고있는 DNA를 추출해보고자 한다.

2. 실험방법
1. 시약을 모은다(Cell down).
2. 호모게이나저와 같은 기계를 사용하여 물리적 파괴를 시킨다.
3. Buffer PG 390 µl, Enhancer solution 7 µl, Proteinase K 20 µl, RNase A Solution 5 µl을 Sample tube에 넣은 후 Voltex한다.
4. Water Bath에 넣는다(65도, 30분/ 5~6회 inverting).
5. Buffer PPT 100 µl을 넣고 잘 섞어준 후에 5분동안 얼음위에 놓는다.
6. 원심분리 한다(13,000rpm, 5min).
7. 상등액 200 µl을 새 1.5ml Tube로 옮긴다.
8. Tube에 Buffer PB 650 µl을 넣고 잘 섞어준다(inverting 5~6회).
9. 8번 과정 이후 만들어진 Sample(침전물)에서 650 µl을 Collection Tube에 삽입된 Spin Column에 넣는다.
10. 원심분리한다(1 min/ 13,000rpm).
11. 9~10번 과정은 반복 하여 재실시 한다.
12. Spin Column을 새 2.0의 Collection Tube에 꽂고 700 µl의 Buffer PWA를 넣는다.
13. 원심분리한다(1ml/ 13,000rpm).

참고 자료

네이버 지식백과] DNA 추출  [DNA extraction] (미생물학백과 )
위키백과[Lysis Buffer]
위키백과[단백분해효소 K]
“Novagen Proteinase K protocol” (PDF). 《Sigma Aldrich》.
[출처] (2) 유전자 추출 : Genomic DNA 추출, Plasmid 추출|작성자 콩알
[출처] 플라스미스(Plasmid) DNA 분리/Plasmid prep
[출처] 코로나 바이러스 진단방법 qRT-PCR