[생물화학공학및실험 A+] Enzyme activity assay

소개글

[생물화학공학및실험] 여섯번째 실험입니다.
[Restriction of DNA]
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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험의 목표는 효소 생성물의 농도를 UV spectrophotometer를 이용하여 측정하고 효소의 활성도를 알아보는 실험이었다. 본 실험에서는 Candida antarctica lipase B(CalB) 효소의 활성도를 측정하고자 했고 p-nitrophenyl butyrate(p-NPB)의 가수분해반응 생성물인 p-Nitrophenol의 농도 변화를 이용하였다. CalB 효소를 넣은 p-NPB용액의 시간에 따른 흡광도 변화를 에서 관찰하고 Lambert-Beer 법칙을 이용해 농도를 구했으며 이를 바탕으로 효소의 활성도()을 계산하였다. 결과적으로 일정하게 증가하는 흡광도 곡선을 관찰할 수 있었고, 40분일 때의 효소 활성도 값을 구할 수 있었다.

2. Experiment
1) 실험 시약
(1) candida antarctica lipase B(CalB)
Figure 1. CalB 효소

‣ CalB는 많은 화학반응을 촉매하는 유용한 효소로서 esterification, transesterfication, hydrolysis, aminolysis, stereoselective transformation 그리고 폴리에스터 합성 등다양한 반응을 한다.

참고 자료

김현숙, 김용환, 대장균에서의 Candida antarctia lipase B 최적 발현, 광운대학교 공과대학 화학공학과, 화학생물공학회지 제 23권 제 5호, 2008. 10. 7.
Kerstin Blank 外 2 名, “Functional expression of Canadida Antarctica lipase B in Eschericha coli”, Journal of Biotechnology 125 (2006), 474-483