Embryonic stem cell culture

목차

1. Introduction
2. Material & Method
3. 고찰

본문내용

실험목적
: Human ESC cell과 mouse ESC cell의 subculture를 통해 cell line을 유지시킨다.

* Stem cell culture

Stem cells는 37℃, 5% CO2 농도로 유지되는 incubator에서 배양되어진다. Stem cells 배양은 stem cells의 미분화 상태를 유지시키는 게 중요한데 stem cells의 미분화가 유지될 수 있는 조건은 feeder cells라고 하는 세포들에 의해 제공받을 수 있다. Feeder cells로 사용되는 세포들은 stem cells의 미분화를 위한 factors, growth factors를 분비하고 또 다른 미분화 기전인 stem cells의 feeder cells과의 세포 접촉이 이뤄지도록 해 stem cells가 미분화를 유지할 수 있는 조건을 맞춰준다. Stem cells와 feeder cells가 유래한 종이 달라도 되기 때문에 주로 사용되는 feeder cells는 mouse 유래의 섬유아세포인 MEF와 STO가 있다. Feeder cells를 이용해 stem cells를 배양하기 위해선 먼저 culture dish에 feeder cells를 미리 배양해야 한다. Feeder cells가 dish에 바닥에 깔릴 정도로 적당한 밀도로 증식되면 γ선을 조사하거나 mitomycin C라는 약품을 처리해서 feeder cells의 분열을 억제한다. 분열이 억제되어도 feeder cells는 여전히 생존해서 stem cells의 미분화에 필요한 여러 인자들을 분비할 수 있다. 준비된 feeder cells에 stem cells를 seeding해서 feeder cells위에 stem cells를 배양하면 feeder cells를 이용한 stem cell culture가 완료된다.

참고 자료

“줄기세포”, Naver지식백과
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5568995&cid=61233&categoryId=61233
“Stem cell”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Stem_cell
“What are Stem Cells?”, Explore StemCells
http://www.explorestemcells.co.uk/WhatAreStemCells.html
“Properties of a Stem Cell”, Explore StemCells
http://www.explorestemcells.co.uk/PropertiesStemCell.html
“stem-cell line”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Stem-cell_line#Methods_of_culture
김윤영; 오선경; 최영민. 인간 배아줄기세포의 배양을 위한 지지세포에 관한 고찰. 대한생식의학회지: 제, 2007, 34.4.
김도엽(2009). Embryonic Stem Cell 배양의 실험적 고찰. BioWave, 11(1): 3.
Available from https://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=review0&id=2380 (Mar 17, 2009)
“Basic pluripotent stem cell culture protocol”, StemBook
https://www.stembook.org/node/720
“[Dyne 29th 기초실험방] Cell counting”, 다인바이오
http://www.dynebio.co.kr/yc/bbs/board.php?bo_table=data1&wr_id=34
“생세포수의 계산”, WELGENE
http://www.welgene.com/mall/m_view.php?ps_db=tech1&ps_boid=8&ps_mode=
“Cell counting”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Cell_counting