중앙대학교 생화학 실험레포트A+(결과레포트)- 진핵생물에서 gDNA추출하기

소개글

생화학실험 레포트 입니다.실험결과에 대한 고찰, Yeast gDNA와 Plant gDNA를 추출할 때에 사용한 시약의 역할 조사. PCR에 대해 일목요연하게 썼으니 도움이 많이 되실겁니다.

목차

1. RESULTS.

2. DISCUSSION
1) 실험결과에 대한 고찰
2) Yeast gDNA와 Plant gDNA를 추출할 때에 사용한 시약의 역할 조사.
3) PCR

3. REFERENCE

본문내용

5. RESULTS.
위 전기영동 결과는 yeast와 plant의 특정 gene을 PCR하여 전기영동한 결과이다.Yeast의 genomic DNA중 RPA gene에 대한 PCR을 한 결과 예상대로 2조를 제외한 나머지 조는 1kb부근에서 band가 나타났음을 알 수 있었다. Plant gDNA중 CYP710A1 gene에 대한 PCR결과에서도 4조를 제외한 나머지 조는 1.5kb 부근에서 band가 나타났음을 확인 할 수 있었다. 또한 1조의 Plant CYP710A1 gene 이외에도 추가적인 band가 350bp부근에서 나타났음을 볼 수있었다.

6. DISCUSSION
1) 실험결과에 대한 고찰
이번 실험에서는 Plant와 Yeast에서 핵산으로 구성된 genomic DNA를 여러 시약을 이용해 추출하여 PCR로 증폭한 뒤 전기영동 하였다. Yeast의 PCR로 증폭한 gene은 RPA이고 Plant의 PCR로 증폭한 gene은 CYP710A1이다. 그리고 결과는 예상과 비슷하게 Yeast는 1kb, Plant는 1.5kb정도에서 각각의 gene의 크기를 알 수 있었다.
다만 2조가 Yeast RPA gene의 band가 나오지 않았고, 4조가 Plant CYP710A1의 band가 나오지 않았으며 1조의 Plant CYP710A1 band 이외의 추가적 band가 생겼음을 확인했다. 이는 PCR과정, 또는 gDNA 추출과정에서 몇 가지 오류가 생성 되었을 수도 있겠다는 생각을 해 볼 수 있었다.
첫 번째로, Annealing temperature와 Tm 사이에서 오차가 생성될 수 있다. Tm이란 이중가닥 DNA가 변성되어 절반이 갈라진 상태로 붙어있게 되는 온도이다. PCR에서 Tm이란 프라이머가 표적 DNA에 절반이 붙을 수 있는 온도이다. 이는 프라이머의 염기구성에 따라 달라지게 되는데, 프라이머의 Tm 값보다 annealing temperature을 너무 높게 해줄시 프라이머가 target gene에 잘붙지 못할수 있다.

참고 자료

[네이버 지식백과] 트리톤 [Triton] (생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 강영희) http://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.rec363.full?text_only=true -[네이버 지식백과] 중합효소연쇄반응 [Polymerase chain reaction] (분자·세포생물학백과)
BIOLOGY, 2018, 박선우