[생명분자공학실험]생명분자공학 실험

소개글

생명공학실험에 대해 기초적인 실험습득에 대한 소개자료입니다.

목차

1. 실험 목적
1) 실험 목표

2. 실험 이론 및 원리
1) 아미노산의 구조와 특성을 이용한 단백질 정량 방법
2) 단백질을 이용한 DNA의 전기영동과 분자량 측정
3) LDH의 효소 작용 mechanism과 효소 활성 측정 방법을 이해
4) 단백질 정제 방법

3. 실험 방법
1) Bradford assay
2) Lowry method
3) DNA 정량과 순도 측정
4) SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동과 분자량 측정
5) Agarose gel 전기영동
6) Lactate dehydrogenase의 효소 활성 측정
7) PD10 Gel filtration
8) Ion exchange chromatography

4. 실험 결과
1) Bradford assay
2) Lowry method
3) SDS-PAGE
4) Agarose gel을 이용한 전기 영동
5) Lactate dehydrogenase(LDH)의 효소 활성 측정
6) PD10 Gel filtration
7) Ion exchange chromatography의 원리를 이용한 LDH단백질 정제

5. 토의 사항
1) 실험 고찰

본문내용

1. 실험 목적
1.1. 실험 목표
생명공학은 21세기 지식 집약 유망산업으로 생명공학의 발전은 국가 경쟁력을 높이는 하나의 좋은 방법이 될 수 있으며 앞으로 그 응용 분야가 무궁무진하고 많은 발전이 기대되는 학문으로 많은 국가에서 생명공학의 발전을 위해서 노력하고 있다. 생명분자 공학 실험은 생명공학을 공부하고 연구하는데 있어서 기초적인 실험이다. 이 실험을 통해서 생명공학 실험 전반에 관한 이론과 원리를 알아보고, 이론 교육과 함께 수행될 일련의 실험을 통해서 새로운 기술의 개발과 연구를 위한 실험원리의 이해와 함께 실험에 관한 기초적인 기술을 습득한다.

2. 실험 이론 및 원리
2.1. 아미노산의 구조와 특성을 이용한 단백질 정량 방법
2.1.1. Bradford assay
그 방법이 매우 빠르며 값싸고 좋은 특이성으로 인해 가장 널리 사용되고 있는 단백질 정량법이다. 단백질의 1차 구조를 형성하는 아미노산은 각각의 잔기의 특성에 따라 몇가지로 분류 된다. arginine, tryptophan, tyrosine, histidine, phenylalanine 같은 아미노산들은 Coomassie Brilliant Blue G-250 (CBBG-250)이라는 염료와 결합하게 되면 최대 흡광도의 shift가 발생하게 된다. 이렇게 아미노산과 결합한 CBBG-250은 595㎚에서 최대 흡광도를 나타내며 파란색을 띠게 된다. 결합하지 않은 CBBG-250은 470㎚에서 최대 흡광도를 나타내며 갈색 또는 붉은색을 띠게 된다. 따라서 단백질에 CBBG-250을 결합시켜 595㎚에서 흡광도를 측정하면 단백질의 양에 따른 값을 얻을 수 있다. Bradford assay는 일반적으로 BSA를 이용해 standard curve를 작성하고 방정식을 구하여 시료의 흡광도를 측정한 후 식에 대입하여 쉽고 간단하게 단백질을 정량 할 수 있는 방법이다.
2.1.2. Lowry method
두 가지 다른 반응 단계로 나뉘어질 수 있다.

참고 자료

없음