(결과레포트) 모근에서 DNA 추출

소개글

모근에서 DNA추출 실험을 토한 결과레포트 자료입니다.
전기영동 실험한 사진도 첨부했구요. A+받은 내용입니다.

목차

1.Subject
모근에서 DNA 추출

2.Introductio

3.Material

4.Methos

5.Result

6.Discussion
1) DNA 추출용액의 역할(Tris-Cl, EDTA, TE buffer, SDS, Proteinase k)
2) 모근에서 DNA를 추출하는 실험시 주위사항
3) loading dye의 역할
4) EtBr의 역할
5) agarose gel전기영동에서 DNA가 전개되는 원리
6) 전기영동의 목적은?
7) 전기영동할때, sixe에 따라 구분되는 이유?
8) 전기영동시에 끌림현상인 스멜링 현상이 나타난 이유?
9) 전기영동 이론
10) 전기영동에서 이동속도에 대한 고찰

본문내용

1. Subject
;모근에서 DNA 추출

2. Introduction
; 전기영동법은 DNA나 단백질(Protein)의 크기 차이를 이용하여 구별하는 방법으로 전기장 안에서 하전된 입자가 양극 또는 음극쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이 때, 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기와 모양 용액의 pH나 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 이온의 세기, 지자체의 종류등 여러 가지 요인에 의해 결정된다. 전기 영동법 중에서 DNA를 분리, 정제하여 크기와 양을 알아보고자 할 때, 가장 많이 쓰이는 방법이 agarose gel 전기영동법이다. 망상구조를 가진 agarose gel에 DNA를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 골격에 인산기(PO4-)를 함유하고 있기 때문에 수용액에서 음전하를 띠어 매질을 타고, 양성축(+극)으로 이동하게 된다. Gel 상에서 DNA에 형광염료인 EtBr로 염색하면 자외선 하에서 DNA를 직접 관찰 할 수 있다.

<중 략>

-머리카락을 1.5ml microtube안에 잘라 넣을 때, 모근 부분이 상하지 않도록 조심해서 잘 라 넣는다.
-1시간동안 water-bath안에서 반응시키면서 vortex 시킬 때, 너무 자주 하거나 너무 오 랫동안 하지 않는다. 너무 자주하거나 오래하면 DNA 이중나선 구조가 깨지기 때문이다.
-원심분리기를 사용할 때, 축이 기울면 안되므로 microtube를 넘을 때, 균형을 맞춰서 넣 어준다. 균형이 맞지 않을겨우 D․W(포도당 멸균 증류수)를 넣은 microtube를 넣고, 원심 분리기를 사용한다. 또한 microtube의 뚜껑이 축을 향하도록 넣는다.
-6×loading dye와 DNA 상층액 sample을 섞을 때, 비율을 맞춰서 섞는다. 6배 농축된 loading dye는 6배 희석시켜야 하므로, 예를 들어 DNA 상층액 5㎕에는 loading dye 1 ㎕를, DNA 상츠액 15㎕에는 loading dye 3㎕를 넣어 같은 비율로 유지시켜준다. 또한 두 용액을 섞을 때에는 pipette을 이용하여 빨아 올렸다 내렸다를 반복하여 섞어주는데, 공기가 들어가지 않도록 마지막엔 천천히 끌어 올린다.

참고 자료

없음