토끼 LDH에 대한 생화학 실험 결과

소개글

토끼의 각 조직으로부터 LDH의 isozyme들을 정제하여 그 특성을 비교 분석함으로써 단백질을 분리, 정제하는 일반적인 방법과 효소의 특성을 규명하는 일반적인 방법 및 이론을 습득한다.

목차

없음

본문내용

생화학 실험 결과 발표
-토끼 LDH의 정제 및 특성-
학습 목표
토끼의 각 조직으로부터 LDH의 isozyme들을 정제하여 그 특성을 비교 분석함으로써 단백질을 분리, 정제하는 일반적인 방법과 효소의 특성을 규명하는 일반적인 방법 및 이론을 습득한다.
실험 제 1일
조직 쇄균화 (Tissue homogenization)
장기 : Kidney
세포막 파괴, LDH와 다른 단백질이 혼재
염석 (Salting out)
단백질의 charge 이용
황산 암모늄의 양에 따라 석출되는 단백질이 다름
실험 제 1일
투석 (Dialysis)
LDH에 붙어 있던 황산 암모늄의 제거
Size에 따른 반투과성 막에서의 diffusion 차이 이용함
실험 제 2일
DEAE-cellulose ion-exchange chromatography
LDH의 정제
LDH의 isoform들이 가지는 charge에 dependent한 분리 방법
단백질 정량
단백질 정량 표준용액을 이용하여 추세선 구함
추세선을 이용하여 각 시료의 단백질 농도 구함
실험 제 2일
추세선 (표준곡선)
실험 제 2일
각 시료의 단백질 농도

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참고 자료

http://kin.naver.com/open100/db_detail.php?d1id=7&dir_id=70901&eid=9XR/Sv3rU4pWjk3wdPGu7z/AYyAjDPcB&qb=vs+/obytIGxkaA==
Textbook of Biochemistry with Clinical Correlations, 4th Edition, T.M. Devlin,de., Wiley-Liss