［식품미생물학실험 ］배지의 제조

소개글

◆ 배지 제조의 기초적 원칙
① 배지제조용 성분 특히 화학약품은 미생물학적 목적에 합당한 것이어야 한다. 화학약품 중에는 세균에 대하여 유독 잔류 성분이 남아 있는 수가 있다.
② 배지제조의 효능 재현을 위하여 화학약품 특히 색소나 억제물질 (bile salts, sodium, acid, selenite)은 상당량을 일시에 구입 하여 계속 사용하는 것이 좋다. 물론 저장 기간 중 변질이나 장소의 협소 등의 불이익이 있으나 배지의 품질관리는 충분히 이루어질 수 있다.
③ 배지제조용 증류수는 가장 중요한 인자이다. 증류 장치는 유리 또는 Stainless Steel로 된 것이 좋다. 이온교환 수지 정수기는 사용된 resin을 선택하여야 하며 이중에는 세균 발육에 유해한 성분을 함유 할 수 있다.
④ 배지제조용 용기(초자기구, Stainless)는 배지의 양에 2배 이상의 용량의 것을 사용한다. 분말이나 고형 선분은 교반하는 증류수에 첨가한다, 용해에 가열이 필요할 때는 열항 수조에서 용해하고 용기를 직접 가열하지 않도록 한다. 이열성성분이 과열로 파괴되지 않도록 주의하여야 한다.

목차

1) Abstract
2) Introduction (실험 원리)
3) Materials & Methods
4) Results & Discussion
5) Reference

본문내용

Ⅱ. 고체배지의 제조

* Materials :
① 배지 : 고체배지 (nutrient agar) - TSA (Tryptic Soy Agar)
② 재료 : 증류수
③ 기구 : 약수저, 삼각 flask, 쿠킹호일, 저울, 마그네틱 종이,
mass cylinder, beaker, petri dish, alcohol lamp, autoclave, 시험관, 버너

* Methods :
① 정밀 전자저울을 이용하여 TSA 를 20g 을 단다.
② 삼각 flask 에 TSA 와 증류수 500 ml 을 섞어준다.
(섞을 때는 흔들어준다. 이때, 쿠킹호일 2 겹으로 뚜껑을 만들어준다. )

③ 불은 가장 센 불로하여 중간중간 흔들어가면서 녹여준다.
④ 삼각 flask 바닥에서 거품이 올라오기 시작하면, 흔드는 횟수를 줄 인다. (이 때 배지가 투명해지고 바닥에 거품이 새끼손가락만큼 있으면 불을 끈다.)
⑤ Autoclave 를 이용하여 멸균을 한다. (121 ℃ , 15 분간)
⑥ 멸균한 배지의 시험관 입구를 화염멸균하여 petri dish 의 뚜껑을 조금 열고 액화 한천배지를 15~20ml 넣는다.
⑦ 배지를 굳힌다.

참고 자료

- 미생물 실험법 / 서승교 외 / 보문각 / 2005년 / p31-44
- 식품미생물실험서 / 박신인 외 / 효일 / 2004년 / p42-43
- 미생물 실험법 / 서승교 외 / 보문각 / 2005년 / p27-28
- 미생물학실험 / 한국미생물학회편/ 아카데미서적 / 1987년 /p96-101
- 최신미생물학 / 배무 외 / 아카데미서적 / 1994년 / p37-49
- 식품미생물실험서 / 박신인 외 / 효일 / 2004년 / p41