SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동

소개글

생명과학실험01 3주차 실험 report 입니다.

공식이나 기본내용은 영어 위키 에서 번역한것이 많고
기타 풀이과정과 공식등은 직접 타블렛으로 쓰고 그려서 첨부했어요.

polyacrylamide gel 만들기 실험과 SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동 실험 두가지를 하고 한번에 쓴 report라 gel만들기까지 자세하게 되어 있습니다.

목차

1. Subject
2. Object
3. Introduction
◉ SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)
SDS ( Sodium dodecyl sulfate )
Polyacrylamide gel 의 형성
Stacking gel
◉ Sample buffer
◉ Bradford Protein assay
◉ Coomassie Staining

4. Material
5. Method
Polyacrylamide gel 만들기
Gel staining 하기
1X Sample buffer 만들기

6. Result
결과사진, 대조사진
7. Discussion
8. Reference

본문내용

Subject
SDS-PAGE 를 이용한 단백질의 분석

Object
Polyacrylamide Gel 을 만들어 Casting 한 뒤 단백질 시료를 전기영동을 통해 분리해 낸 다. 그리고 쿠마시(Coomassie) staining 을 한다.

Introduction
◉ SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)
1. SDS ( Sodium dodecyl sulfate )
SDS는 Sodium Dodecyl Sulfate(CH3(CH2)11OSO3Na)의 약어로 음이온화 계면활성제의 일종이다. 단백질과 가장 강력한 결합력을 보이기 때문에 실험실에서 일반적으로 SDS는 protein의 전기영동을 위한 준비물로 사용된다. SDS는 protein의 polypeptide backbone을 파고들어 비공유결합을 방해한다. SDS 한분자에 amino acid 가 두 분자 binding 하면 protein의 내부 전하들이 SDS의 negative charge에 묻혀 무시할 수 있을 정도로 변한다. 그러면 Polypeptides가 일정한 - 전하를 가지게 되고 그 구조도 지팡이같은 모양으로 변하기 때문에 비로소 전기영동에 사용할 수 있게 된다. 즉 SDS는 모든 단백질을 일차구조로 바꾸어 분리시키고, 모든 단백질에 음전하 를 띄도록 하게 한다.

참고 자료

http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm#Theor http://en.wikipedia.org/wiki/SDS_PAGE
http://www.science.smith.edu/departments/Biochem/Biochem_353/Bradford.html
http://biotechnology.tistory.com/34