UV를 이용한 단백질의 절대량 분석 및 SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동 레포트

소개글

"UV를 이용한 단백질의 절대량 분석 및 SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동 레포트"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Title

Ⅱ. Abstract

Ⅲ. Introduction
1. 단백질의 정량법
2. 단백질의 전기영동의 기본 원리(단백질이 - charge에서 + charge로 움직이는 이유 및 separating gel과 stacking gel에서 각각 pH 8.8과 pH 6.8을 사용하는 이유)
3. 단백질 전기영동시 beta-mercaptoethanol, Bromophenol blue의 역할 및 commassie blue를 이용한 단백질의 염색원리

Ⅳ. Materials&Methodes
1. Reagent
2. Apparatus
3. Methode

Ⅴ. Results

Ⅵ. Discussion

본문내용

Ⅰ. Title
UV를 이용한 단백질의 절대량 분석 및 SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동

Ⅱ. Abstract
본 실험은 BSA standard solution을 가지고 미지 concentration의 sample 1,2,3의 concentration을 DC protein assay를 통해 알아내고, sample 1,2,3을 marker와 함께 SDS-PAGE를 통해서 loading하여 sample의 양을 다시 한 번 확인 한다. 본래는 gel도 직접 만들어야 했으나, 시간관계상 미리 만들어 놓은 gel을 사용했고, experiment에서는 DC protein assay와 electrophoresis만 진행되었다.

Ⅲ. Introduction

1. 단백질의 정량법
1) UV법
단백질에 있는 티로신, 페닐알라닌 및 트립토판 잔기들은 각각 275nm와 280nm의 자외선을 흡수한다. 많은 단백질들에 있어 이 아미노산들을 합친 수준은 거의 일정하므로 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도와 비례하게 된다. 단백질의 흡광도는 주로 아로마틱 잔기에 기인하는 점에 주목해야 하며 참고로 펩타이드 결합의 경우는 ~200nm에서 빛을 흡수한다. 흡광계수(빛이 시료 1cm를 통과할 때의 흡광도)는 단백질 시료에 따라 다르다. 대부분의 단백질의 값이 1mg/ml 시료에 대하여 0.4~1.5 정도이며 아로마틱 잔기의 조성이 높은 라이소자임은 2.65, 티로신과 트립토판이 거의 없는 pravalbumin은 0.0의 값을 갖는다. 원하는 단백질의 흡광계수 값을 알면 시료의 농도를 측정할 수 있다. 이에는 람버트-비어의 법칙이 적용된다.
A=εbc (A:흡광도, b:빛이 지나가는 시료층의 두께 c:빛이 지나가는 시료의 농도 ε:흡광계수)

2) Bicinchoninc Acid(BCA법)
BCA법은 Lowry method을 개량한 것으로 Folin시약의 반응 대신..

<중 략>

참고 자료

없음