[생명공학]DNA 추출

소개글

DNA 추출에 관한 Report입니다. 분량은 A4용지 6장이고, 11개의 참고자료가 첨부되어 있습니다. DNA 추출에 관한 모든 실험과 그 실험들의 원리에 대하여 사진까지 첨부되어 있어 다양한 용도로 사용하실 수 있습니다.

목차

1. the principles of DNA extraction from Living cells
(1) the principles and the methods of Cell lysis(세포 용해의 원리와 방법)
(2) the principles and the methods of removing contaminants by organic extraction and enzyme digestion(유기적 추출과 효소 소화로 인한 오염물질 제거 원리와 방법)
(3) and others(또 다른 DNA 추출의 방법)

2. the principles and methods and the application of the gel-electrophoresis.
(gel 전기영동의 원리와 방법)
3. the principles and the methods of visualizing DNA molecules in a gel.
(gel에서 DNA시각화의 원리와 방법)

본문내용

1. the principles of DNA extraction from Living cells
(1) the principles and the methods of Cell lysis(세포 용해의 원리와 방법)
Cell lysis는 우리말로 세포 용해로, cell barrier에 영향을 주는 화학적 인자(cell lysis solution)에 노출시켜 cell을 용해시키는 화학적 방법이다. cell wall을 공격하는 agent와 cell membrane을 공격하는 agent를 이용한다.

<cell lysis solution의 종류와 그 원리>
(1) Sol 1 : resuspension buffer
성분 : 0.05M glucose, 0.01M EDTA, 0.025M Tris-HCl, pH 8.0, lysozyme (1mg/mL)
- EDTA는 거의 모든 금속이온과 안정한 수용성 킬레이트를 형성한다. 그래서 이것을 세포벽에 처리해주면 세포벽의 integrity를 유지하는데 필수적인 calcium ion을 제거하여 균열이 생기면서 세포벽이 군데군데 무너지기 시작한다.
- 이 때 세포를 증류수나 기타 낮은 농도의 용매에 넣어두면 삼투압 현상이 일어나면서 세포가 완전히 깨지게 된다. 이것을 방지해주는 것이 glucose이며, 즉 이것은 삼투압을 유지시켜 세포의 외형을 유지하는 역할을 한다. 이 과정에서 실험상 vortex를 해야 하는데 이때 세포가 완전히 깨져버리게 되면 chromosomal DNA가 잘게 깨지면서 plasmid DNA와 구분할 수 없게 된다. 그래서 이렇게 세포를 유지시켜가면서 세포벽만 깨는 것이다.
- lysozyme은 세균의 세포벽에 있는 다당류 중의 n-아세틸무람산(NAM)과 n-아세틸글루코사민(NAG)사이의 β-1,4-글리코시드결합을 가수분해하는 효소로 세포벽의 분해를 돕는다.

참고 자료

http://kin.naver.com/db/detail.php?d1id=11&dir_id=110205&eid=no/iLBVNX6wp4tFFYdoLVeqDsYFcP1p9&qb=Y2VsbCBseXNpcw==
http://blog.naver.com/challengekt?Redirect=Log&logNo=12706450
http://100.naver.com/100.nhn?docid=134385
http://blog.naver.com/baw6293157?Redirect=Log&logNo=25605351
http://life.yonsei.ac.kr/bbs/down.html?f_name=%B4%DC%B9%E9%C1%FA%BA%D0%B8%AE.doc&b_num=1207
http://www.kjcp.co.kr/note/lecture%20note/molsil-korean/molsil-note/4-Purification%20of%20DNA.htm
http://kbiotec.kijeon.ac.kr/pro_master/book_2_3.asp
http://blog.naver.com/didwns1027?Redirect=Log&logNo=140012497300
http://www.nonoil.com/bio/engineering/chapt3.htm