[식품미생물학 및 실험 보고서] 그람 염색(Gram stain)

목차

1. 실험 일자
2. 실험 원리 및 배경
3. 재료 및 기구
4. 실험방법
5. 결과 및 고찰

본문내용

실험 원리 및 배경
생균체를 현미경으로 관찰하게 되면, 미생물은 무색이고 투명하기 때문에 명암의 차이가 크지 않아서 관찰이 불편한 경우가 많다. 따라서 이들의 분류와 특성을 알기 위해서는 생물학적 염색 과정을 거쳐야만 한다. 세균의 염색은 일반적으로 세포의 모세관 현상, 삼투압, 세포에의 부착과 흡수에 의한 물리적 기전과, 세포 구성물과 염료 사이의 전기적 전하와 화학적 친화력에 의해 염색된다. 염색 시약의 화학적 구성은 무색의 benzene ring에 연결된 발색군(chromophore group)과 조색군(auxochrome group)을 합한 유기복합체이다.

균체를 염색하여 검경하는 염색법은 검경 목적에 따라 많은 염색법이 있다. 염색법의 종류에는 단순 염색법(simple staining), Gram 염색법(Gram staining), 포자 염색법(spore staining)이 있다.

- 단순 염색법(simple staining)
세균의 기본적인 형태, 크기, 배열을 관찰할 수 있는 염색법으로, 가장 일반적으로 사용되는 염색액은 염기성 색소인 methylene blue, crystal violet, gentian violet, carbol fuchsin 등이 있다.

- Gram 염색법(Gram staining)
Gram 염색법과 같은 감별 염색 방법(differential staining)은 세균 분류학에서 매우 중요한 기술 중의 하나이다. 이 방법은 1884년 덴마크의 세균학자 Christian Gram에 의해 최초로 고안되었으며, 시약의 조정 및 처리 시간을 달리한 변형 방법이 개발되었으나 기본적으로 네 가지 시약이 사용됨은 동일하다. 즉 염기성 염색액(주로 crystal violet), 매염제(Iodine), 탈색제(alcohol, acetone 및 이 둘의 혼합액), 대조 염색제(주로 safranin O) 등이 사용된다.

참고 자료

박신인·남은숙, 『식품 미생물학 실험서』, 도서출판 효일, 2012, 80-82쪽, 87쪽
한국전자현미경학회기술연구회, “현미경의 종류”, http://ksemt.kr/down/mickind.pdf
이용구의현미경실험실1, “생물 현미경 사용법”, http://yonggulee.egloos.com/v/3413391