플라스미드 DNA 추출 결과
- 최초 등록일
- 2014.03.18
- 최종 저작일
- 2013.10
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목차
1. 실험 결과
2. 고찰
본문내용
*lysis : 세균의 세포벽이 파괴되어 내용물이 용액으로 방출된 세균의 용해현상.
* cell을 깨는 다른 방법(cell-lysis)
·물리적인 방법
1) blender에 갈기
2) agitation (액체를 휘저음)
3) sonication (음파처리) : 20kHz 이상의 파장을 쏘여줄 경우 gaseous cavitation이 형성 되고 형성된 gas bubble이 깨지면서 shock가 일어나 세포가 파쇄되는 원리를 가지고 있다. 주의 사항으로서는 contact time 이 증가할수록 heat, free radical, ion 등이 생성되어 단백질 등을 변성시킬 수 있으므로 반드시 얼음에 고정시킨 상태에서 실험을 하여야 한다.
<중 략>
이 단계가 lysis 단계라고 하셨다. 그리고 다시 4℃, 13000rpm으로 3분간 원심분리를 한 뒤 새 튜브에 액체 상층액만을 부었다. 액체 상층액에 DNA가 있기 때문인데 덩어리가 들어오지 않게 액체만을 따라내었다. 여기에 99.9% 에탄올을 넣었다.
참고 자료
없음