[전기영동] 전기영동
- 최초 등록일
- 2002.05.27
- 최종 저작일
- 2002.05
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목차
1. polyacrylamide gel electrophoresis
2. disc-gel electrophorsis
3. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis
4. Agarose gel 전기영동
본문내용
PAGE는 acrylamide와 bis-acrylamide를 중합시켜서 형성된 gel을 이용하여 전기영동을 하는 것으로 단백질 입자가 acrylamide의 공극 사이를 지나가게 됨으로써 입자가 큰 것은 진행속도가 더디고, 입자가 작은 것은 진행속도가 빠르게 되며, 같은 크기의 입자이면 하전량이 많은 것이 더 빨리 이동하게 되는 원리를 이용하여 일정 시간 동안 움직인 거리에 의해 단백질 종류를 구분하는 방법이다. SDS등을 사용하지 않으므로 nondenaturing gel electrophoresis또는 nateve gel electrophoresis라고도 하며, 효소 등과 같이 분석중에 변성되면 안 되는 종류를 분석할 때 많이 이용된다. 실험중에 단백질의 변성을 막기 위해 추출이나 전기영동작업은 0∼4℃정도에서 하는 것이 좋다.
PAGE에 의해 전개되는 정도는 gel의 농도와 buffer의pH, 전압 등에 따라 차이가 있다. gel의 농도는 높아질수록 공극의 크기가 작아지므로 분자량이 적은 것을 분석할 경우에는 gel의 농도를 높이고, 분자량이 큰 것을 분석할 경우에는 반대로 gel의 농도를 낮춘다. gel의 농도는 4∼25%정도를 이용하는데 7∼15%정도의 농도가 가장 많이 이용된다. 그리고 acrylamide와 bis-acrylamide의 비율에 따라서도 전개정도에 차이가 난다.
참고 자료
전기영동( 한규상저, 진문사. 1994 )