Micro BCA정량법

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미지의 단백질 농도를 정량

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1.실험제목:MicroBCA 정량법
2.실험목적: 미지의 단백질의 농도를 정량
3.서론:
단백질이 구리 이온 (Cu 2_)을 Cu 1+ 로 환원(Reduction) 시킬 수 있는 성질을 이용한 것이다. 단백질에 의해 환원된 구리 이온은 bicinchroninic acid (BCA)용액과 반응을 해서, 보라빛의 화합물을 생성하게 된다. 이 반응은 두 단계로 일어난다.

1. Protein + Cu 2+ + OH- → Cu +
2. Cu + + 2 BCA → Cu +/BCA chromophore
이렇게 생성되는 화합물은 빛의 특정 영역(562nm)에서 구리 이온이 담긴 용액과 BCA용액 각각보다 빛의 흡수율이 높기에, spectrophotometer를 사용해서 측정하면 흡수율 차이를 측정할 수 있다.

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