[A+ 리포트] BCA 단백질 정량 & Acrylamide gel 만들기

소개글

본 리포트는 BCA 단백질 정량에 관한 개념과 방법이 자세히 기술되어 있습니다.
참고하시어 좋은 결과 쟁취하시기 바랍니다.

목차

1. Date

2. Title

3. Purpose

4. Materials

5. Method
가. BCA 단백질 정량
나. Acrylamide gel 만들기

6. Result
가. 동일한 양의 단백질을 loading하기 위한 계산 값 구하기
나. Acrylamide gel 제조 결과

7. Discussion
가. BCA 단백질 정량의 원리 및 특징
나. Acrylamide gel의 구조적 특징

8. Remark

9. Reference

본문내용

1. Date : 2020.05.27

2. Title : BCA 단백질 정량 & Acrylamide gel 만들기

3. Purpose :
가. BCA 단백질 정량을 통해 loading할 단백질의 양을 정량할 수 있음.

나. SDS-GAGE에 필요한 acrylamide gel을 제조할 수 있음.

4. Materials : 96 well plate, RIPA buffer, 마이크로 피펫(200~1,000㎕, 20~200㎕), 피펫팁, wt(wild type) sample, ko(knock out) sample, BCA Protein Assay Kit, 15ml conical tube, 2x laemmli sample buffer, b-ME, 1.5ml tube, spin down centrifuge, tube holder, DW(증류수), 40% acrylamide mix, 1.5M Tris-HCl buffer(pH8.8), 0.5M Tris-HCl buffer(pH6.6), 10% SDS, 10% ammonium persulfate, TEMED, 50ml conical tube, 정밀전자저울, 시약스푼, 70% 에탄올, casting stand, casting frame, casting stand gasket, spacer plate(1.5mm), short plate, comb

5. Method :
가. BCA 단백질 정량
1) 96 well plate에 blank, wt, ko 순으로 labelling함.
2) RIPA buffer를 labelling한 well에 각각 20㎕씩 넣음.
3) blank에 RIPA buffer 5㎕, wt에 wt sample 5㎕, ko에 ko sample 5㎕를 넣음.

참고 자료

TaKaRa, “TaKaRa BCA Protein Assay Kit”, 2020.06,
https://www.takara.co.kr/file/manual/pdf/T9300A_e.v1906Da.pdf.
Patricia Barril, Silvia Nates, Introduction of Agarose and Polyacrylamide Gel Electrophoresis Matrices with Respect to Their Detection Sensitivities, Argentina, Dr. J. M. Vanella, 2012.
BIO-RAD, “Introduction to Polyacrylamide Gels”, 2020.06,
https://www.bio-rad.com/ko-kr/applications-technologies/introduction-polyacrylamide-gels?ID=LUSPBRM5B.