본 실험에서 eGFP 유전자는 형질전환 시 삽입된 plasmid DNA 내에 존재하며, 이 DNA는 앞선 실험에서 계속 사용해왔던 재조합된 pET-22b(+) vector이다. vector의 ... 본 실험에 사용한 균은 형질 전환(Transformation)을 통해 eGFP 유전자가 재조합 된 pET-22b(+) plasmid DNA를 포함하는 E. ... Clean-bench 작업 시 반드시 70% EtOH로 장갑 및 기구 소독을 진행하여야 한다. (4) 미리 배양 된 세포(eGFP DNA 흡광도를 측정한다. (7) O.D 값이 0.6
원래의 pET-22b(+) DNA는 약 5.5kbp인데 여기에 0.8kbp의 eGFP와 다른 유전자 1.7kbp를 넣어 총 8.0kbp의 pET-22b(+) DNA를 만들었다. ... 이를 제한 효소를 3가지를 이용하여 5.5kbp, 1.7kbp(another gene), 0.8kbp(eGFP)로 잘라준 것이다. eGFP와 another gene의 길이는 protocol의 ... eGFP(0.8kbp) - EcoR1 - another gene(1.7kbp) - Xho1 in pET-22b(+) > Figure 6. pET-22b(+) DNA(8.0kbp) Figure
The 293T cell has DNA, DAPI stains DNA and show on fluorescence microscope. ... Bind the DNA to matrix and elute the DNA. Before ligation the gene and vector, they cut ... The ligase catalyzed with T4 DNA ligase.
그 결과 EGFP(+): 5.4615uL, EGFP (-): 2.7203uL를 사용하게 되었다. ... 먼저 저번 실험에서 얻은 RNA의 농도는 EGFP(+): 367.6ng/uL, EGFP(-): 183.1ng/uL로, RNA를 1000ng으로 맞춰주기 위해 1000ng/RNA농도를 ... 이때 DNA가 샘플에 남아있게 된다면 오차가 발생할 수 있으므로 잘 처리해야 한다. cDNA를 합성하는 과정을 진행했는데 물 NFW, dsDNase buffer, dsDNase순으로
이번 실험을 통해 EGFP가 있는 세포와 EGFP가 없는 세포에 Trizol을 처리한 후 RNA를 정 제하여 nano drop을 이용해 농도와 순도를 알아보았다. ... DNA는 변성되면 chloroform층으 로 녹아들어간다. ... 이때 phenol은 강한 산성으로 DNA를 파 괴(depurination)하지만 RNA는 안정(depurination)하다.
실험에 사용한 plasmid DNA pCDNA3.1-eGFP의 size는 6173 bp 그 중 eGFP의 size는 720 bp. ... Nanodrop을 통해 분석한 template DNA의 농도는 plasmid DNA pCDNA3.1-eGFP의 경우 105.4 ng/㎕ 그 중 eGFP의 농도는 2.5 ng/㎕. ... DNA pCDNA3.1-eGFP에 Restriction Enzyme(EcoRⅠ, XhoⅠ)를 처리한 후 electrophoresis한 사진.
이를 UV transilluminator를 통해 대조군과 비교하였다. eGFP DNA이 포함된 배지는 녹색 형광빛, eGFP DNA를 포함하지 않는 대조군은 파란색을 띠었다. 2. ... 그림 3 실험결과 그림 3을 보면 대조군은 파란색, 실험군인 eGFP DNA가 포함된 배지는 녹색 형광빛을 띤다. eGFP DNA는 UV파장, 파란색 계열의 파장대에서 녹색 형광빛을 ... Abstract Transformation하여 재조합된 DNA(eGFP DNA)를 가진 cell을 고체배지에 배양하고 single colony를 채취하여 이를 액체배지에 배양하였다.
카세트의 상류측 세균 프로모터는 대장균에 대해 카나마이신 내성을 발현한다. p EGFP-N2 백본은 또, 대장균의 증식을 위한 pUc 복제 기원 및 외가닥 DNA 생산을 위한 f1 ... -CMV-1E 시퀀스 MCS에 복제된 유전자는 다음 경우에 EGFP의 N말단의 융합으로 나타난다. 이것들은 EGFP와 같은 판독 프레임에 있으며, 중간정지 코드는 없다. ... 표적 유전자를 EGFP-N1에 복제하고 EGFP 코딩 배열과 프레임내에 존재하고, 프레임 내 정지 코돈을 개의치 않도록 한다. 삽입된 유전자는 개시 ATG 코돈을 포함한다.
녹색 형광 단백질이 재조합된 DNA(eGFP DNA) 4. ... LB배지에 eGFP DNA 포함된 세포 5ml 주입(좌), shaking incubator에서 37 ℃로 배양 ⑸배지가 들어 있는 다른 1개의 플라스크에는 eGFP DNA 미포함된 ... eGFP DNA의 이론적 특성으로 볼 때, 녹색 형광 발0
실험의 결과, eGFP DNA가 포함되어 있지 않은 대조군에서는 녹색의 형광빛이 관찰되지 않은 반면 eGFP DNA를 넣어준 실험군에서는 모든 조에서 녹색의 형광빛이 관찰되었다. ... Fig 9 . eGFP DNA를 포함하는 4번 실험군을 5ml 채취해 플라스크에 주입 (5) 대조군으로 미리 배양 된 세포(eGFP DNA 미포함) 5ml을 나머지 플라스크에 넣은 ... Abstract 이번 실험은 액체LB배지에 eGFP DNA가 포함되어 있는 실험군과 포함되어 있지 않는 대조군을 배양시킨 뒤 두 플라스크에 단백질발현 유도물질인 IPTG를 넣어 배양시키고
그 결과 일반적인 eGFP에 대한 DNA Band가 나왔으며, Lowry assay를 통해 농도를 측정한 뒤 Spectrofluorometery를 통해 eGFP가 맞는지 그래프를 통해 ... 통해 불순물을 제거하고, SDS-PAGE를 통해 DNA의 Size를 알아보았다. ... 확인하였다. eGFP를 Extinction coefficient assay와 Lowry assay로 정량한 결과, Extinction coefficient assay의 eGFP 농도가
이는 저번 실험 Transformation에서 재조합된 DNA (eGFP DNA)이다. ... 대조군은 녹색형광단백질 eGFP DNA를 포함하지 않은 세포를, 실험군은 eGFP DNA를는 이때 세포 수가 기하급수적으로 증가하기 때문에 실험 시간을 효율적으로 사용할 수 있으며 ... 그 후 UV를 쬐어 eGFP DNA가 없는 대조군과 비교해 형광물질이 존재하는지 확인하였다.
Abstract 이번 실험은 eGFP DNA와 Ampicillin 내성 DNA를 지닌 recombinant DNA를 액체 LB배지에 배양하여 transformation되지 않은 대조군과 ... DNA 포함) 5 ml을 플라스크 하나에 넣은 후, shaking incubator에서 37℃로 배양한다. (5) 대조군으로 미리 배양 된 세포(eGFP DNA 미포함) 5ml을 ... 두 번째는 transformation된 eGFP가 어떠한 이유로 변형되어 eCFP가 발현되었을 경우이다. eCFP는 eGFP의 돌연변이 형태로 238개의 아미노산들로 이루어진 eGFP
재조합 시 mCherry는 transformation이 되지 않고 EGFP vector만 transformatiowww.promega.kr/products/cloning-and-dna-markers ... Gel의 band가 0.4kb~0.3kb사이에 위치하는 것으로 EGFP만 발현된 것을 확인할 수 있고 mCherry의 band는 0.7kb 부근에서 확인되지 않은 것으로 보아 균주 ... 실험 결과 (Colony PCR) [10] 우리가 사용한 7번 sample에 주입한 vector은 각각 EGFP vector의 크기는 3400bp, mCherry vector의 크기는
Abstract 이번 실험은 eGFP DNA를 포함하고 있는 유전자가 포함된 세포를 액체 배지에 배양하고 IPTG를 첨가하여 특정 유전자를 발현시켜 그것을 확인해보는 실험이었다. eGFP ... 그 후에 UV transilluminator를 이용하여 대조군(eGFP를 포함x)과 비교해보았을 때 모든 조에서 각각 eGFP DNA를 포함하고 있기 때문에 녹색 형광빛을 나타냈음을 ... 미리 배양된 세포(eGFP DNA 포함) 플라스크에 넣는 과정Figure 2. shaking incubator에서 배양하는 과정 37℃는 E.coli가 가장 활성화 되는 온도이다.
해당 시험 과정에서 사용한 1번 실험의 DNA는 T7 promoter 부위부터 Nde1서열의 전면부까지 85kbp, Nde1, eGFP, EcoR1, 1.7kbp의 유전자, 2532kbp의 ... 해당 값에 추가하여 eGFP : 0.8kbp, Another gene : 1.7kbp을 더하면 최종적으로 약 2.852kbp가 나오게 된다. ... 추가로 본 조뿐만 아니라 전체 조 실험 결과가 좋지 않은 것으로 보아 미리 재조합된 eGFP, Another gene에 의한 결과로 예측된다. 5.
이러한 방법을 개선하기 위해서, 유전자 조작과정에서 형광단백질을 암호화 하는 eGFP DNA를 삽입하여 단백질 발현을 가시적으로 확인할 수 있다. ... 때문에 5조 실험결과와 달리 녹색 형광을 나타내지 않음을 확인할 수 있으며, eGFP DNA를 포함하는 균의 성장이 잘 일어났음을 확인할 수 있다. ... Experiment 1 (5) 대조군으로 미리 배양 된 세포(eGFP DNA 미포함) ) 5을 나머지 플라스크 넣은 후, shaking incubator에서 37로 배양한다. (6)
Xma1 Age1 pEGFP-C1 4731bp eGFP Nhe1 Xma1 Xba1 Xma1 pLenti-M1.4 7149bp Xba1 Xma1 pEGFP/Lenti-M1.4 eGFP ... eGFP Nhe1 Xma1 insert vector insert vector figure 2는 제한효소로 vector와 insert를 자른 restriction digestion ... 결과이다. insert의 경우, 아래 부분에 우리가 원하는 약 800bp의 EGFP fragment를 확인할 수 있다. vector의 경우, 자르고 남은 부위가 아주 작아서 이미 밑으로
