RT(역전사효소) PCR 실험 보고서

소개글

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목차

1. Introduction
1.1 Reverse Transcriptase (RT)
1.2 One/Two step RT PCR

2. Materials and Apparaturs

3. Methods

4. Result

5. Discussion

6. Reference

본문내용

지난 실험들을 통해 식물, 동물 세포로부터 유전 물질 DNA, RNA를 추출하는 실험을 하였다. 식물의 경우 세포막을 둘러싸는 세포벽의 존재로 유전물질의 추출에 앞서 세포벽을 파쇄하는 과정이 필요했다. 저번 실험을 통해 추출해낸 RNA들은 세포들이 살아있을 당시에 발현에 필요한 유전자들을 전사시킨 재료들을 준비한 것이다. 이번 실험에서 진행한 RT PCR을 비로소 실제 세포가 발현하고 있던 유전자들을 확인하였다.
시판되는 Kit들의 성분들의 역할을 찾아 향후 실험을 진행할 때 올바른 Kit의 선별에 도움이 될 것으로 기대된다.

1.1 Reverse Transcriptase (RT)
Reverse Transcription 과정을 통해 RNA 주형가닥으로부터 상보적인 DNA(cDNA)를 생성한다. 이때 사용되는 효소가 RT이다. 1970년의 첫 RDDP의 발견 이후 눈부신 발전으로 역전사바이러스학과 암 유전학의 토대가 되어왔다. 이로서 1980년대 수면 위로 드러난 HIV, Human 백혈병 바이러스와 같은 병원 균에 대한 연구가 수월해졌고, 분자적 단위의 세포 신호전달과 같은 분야와 더불어 암에 대한 통찰력이 처음 생겼다.

참고 자료

Hizi, A., Tal, R., Shaharabany, M., & Loya, S. (1991). Catalytic properties of the reverse transcriptases of human immunodeficiency viruses type 1 and type 2. Journal of Biological Chemistry, 266(10), 6230-6239.
Schultz, S. J., & Champoux, J. J. (2008). RNase H activity: structure, specificity, and function in reverse transcription. Virus research, 134(1-2), 86-103.
Martín-Alonso, S., Frutos-Beltrán, E., & Menéndez-Arias, L. (2021). Reverse transcriptase: from transcriptomics to genome editing. Trends in Biotechnology, 39(2), 194-210.
Coffin, J. M., & Fan, H. (2016). The discovery of reverse transcriptase. Annual review of virology, 3, 29-51.
P. Singh Kshatriya (2016). One step and Two step RT-PCR, GENAXXON bioscience
Sujata Dhar, BioChain, The enzyme which made its mark in molecular biology