[예방약학실험6] RT-PCR

목차

1. Experimental purpose
2. Material
3. Method
4. Result
5. Discussion
6. Quiz
7. References

본문내용

1. Experimental purpose: RNA를 추출하고 cDNA를 합성하고 RT-PCR로 증폭한다.
2. Material: Labozol, Chloroform, Isopropanol, DEPC water, 75% EtOH, TOPscriptTM RT DryMIX, 2X IP Taq PCR master mix, Agarose, EtBr solution
3. Method
RT-PCR 과정 중에서 RNA extraction 단계만을 진행했다. 이후 과정은 cDNA 합성, GAPDH와 Twist 1 primer을 이용한 RT-PCR, PCR running으로 이어졌다.
A. Lysis
60mm 접시당 Labozol 1ml를 첨가하여 배양접시 내에서 직접 세포를 용해시켰다.
B. RNA separation
i. Labozol 1ml 당 chloroform 0.2 ml를 첨가하고 15초간 vortex한 뒤 실온에서 10분 간 방치했다.

참고 자료

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/7291
한국약학교육협의회 약물학분과회, 약물학, 범문에듀케이션, 2018
한국약학교육협의회 예방약학분과회, 예방약학 제8판, 신일북스, 2017