[생명과학실험]_ Real-time PCR을 이용한 유전자 발현분석 A+레포트 입니다.

소개글

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목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Result
Ⅲ. Discussion

References

본문내용

 RNA sequencing
RNA sequencing이란 DNA로부터 전사되는 모든 RNA전사체(transcriptome)의 염기서열을 비교하여 발현의 차이를 확인하는 분석법이다. 이러한 방법을 통해 유전자의 발현량, 염기서열의 변이, alternative RNA splicing, SNP(단일염기 다형성)등의 정보를 얻을 수 있다. 또한 mRNA 뿐만 아니라 microRNA, siRNA 등 모든 RNA를 대상으로 분석할 수 있다.
RNA sequencing을 하기위해서는 먼저 세포로부터 RNA를 추출한 후 DNA 분해효소를 처리하여 유전체DNA를 제거하고 Gel 전기 영동을 통해 RNA의 상태와 양을 파악한다. 이후 RNA선택 과정을 통해 원하는 RNA를 선택적으로 고르고 역전사 반응을 통해 cDNA를 합성한다. 합성된 cDNA들은 염기서열 분석을 위해 적당한 길이로 fragmentation되고 fragment 양 끝단에 adapter등 sequencing에 필요한 서열을 붙여 library를 제작하고 원하는 cDNA서열을 PCR을 통해 증폭시킨다. 이후 증폭된 절편을 quality control 과정을 거쳐 염기서열분석을 하게 된다.

참고 자료

Kiss T (July 2001). “Small nucleolar RNA-guided post-transcriptional modification of cellular RNAs”. 《The EMBO Journal》 20 (14): 3617–22. doi:10.1093/emboj/20.14.3617. PMC 125535. PMID 11447102.
Gilbert, S. F. (2000) Developmental Biology, 6th Ed. Sunderland MA, Sinauer Associates.
Molecular biology of the gene (Watson저, 5판, Pearson Benjamin Cummings, Cold Spring Harbor Laboratory Press), 분자생물학 (Weaver저, 5판, 라이프사이언스)