일반생물학실험2_세포 생존율 분석(Trypan_blue, WST)
- 최초 등록일
- 2022.09.18
- 최종 저작일
- 2021.10
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소개글
"일반생물학실험2_세포 생존율 분석(Trypan_blue, WST)"에 대한 내용입니다.
목차
1. 세포막 보전도의 차이를 이용한 세포 생존율 분석
2. 미토콘드리아 대사율을 이용한 세포 생존율 분석
본문내용
Objectives:
세포에 약물을 처리한 후 세포 생존율(Cell viability)을 확인하는 분석 방법은 원리에 따라 여러 개 존재한다. 그 중 Trypan blue exclusion assay와 Formazan-based assays중 하나인 WST(Water Soluble Tetrazolium) assay를 진행한다. 세포막 보전도의 차이와 미토콘드리아 대사율을 이용해 세포 생존율을 구한다. 또한 실제로 Rotenone은 살충제로도 쓰이는 독성을 나타내는 물질인데, 세포 생존율의 첨가한 Rotenone에 따른 변화를 통해 Rotenone의 세포독성(Cytotoxicity)의 영향을 알아본다.
세포막 보전도의 차이를 이용한 세포 생존율 분석
Introduction:
세포 생존율을 확인하는 분석 방법 중 Live cell과 Dead cell의 세포막 보전도의 차이를 이용하는 방법이 Trypan blue exclusion assay이다. Trypan blue exclusion assay는 Trypan blue의 특성을 이용한 색소배제실험이다. Trypan blue는 생체염색용 산성 색소로 막에 상해가 있는 세포(Dead cell)에 빠르게 침입하여 푸르게 염색하는데, 막에 상해가 없는 건전한 세포(Live cell)에는 침입하지 않는다.
다시 말해, 살아있는 세포의 membrane은 정상적인 기능을 하므로 Trypan blue가 통과되지 않아 현미경 상에서 염색되지 않고 동글하고 하얀 빛나는 모양으로 보이고, 죽은 세포는 membrane이 망가져 기능을 상실했으므로 Trypan blue가 통과하여 현미경에서 청색으로 염색된 세포로 보일 것이다. 이를 통해 현미경으로 Live cell과 dead cell을 구분하고, Hemocytometer를 이용해 세포의 수를 측정해서 세포 생존율을 분석할 것이다.
이 실험의 조작변인은 가하는 Rotenone의 양이다. 각 well의 세포 생존율을 분석하여 Rotenone의 세포독성을 확인 할 수 있을 것이다.
참고 자료
없음
