유전학 실험 PCR amplication & RFLP

최초 등록일
2016.01.24
최종 저작일
2015.03
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목차

1. Introduction
1.1 실험 목적
1.2 실험 이론 및 배경
1.3 실험 결과 예상 및 가설

2. Materials & Methods
2.1 Materials
2.2 Methods

3. Result

4. Discussion

5. Reference

본문내용

1. Introduction
1.1 실험 목적
- PCR의 원리를 이해한다.
- RFLP의 원리를 이해한다.

1.2 실험 이론 및 배경
■ Polymerase Chain Reaction(PCR)
- PCR이란, Polymerase Chain Reaction(PCR)의 줄임말로 중합효소 연쇄반응이라 한다.
- PCR은 유전자를 증폭하는 방법으로 이미 알고 있는 일부의 염기 서열 중 특정 DNA 부위를 반복 합성하여 원하는 DNA 분자를 증폭시키는 방법이다. 이 방법은 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA합성이 가능하므로 분자생물학적으로 제한효소의 발견만큼이나 아주 획기적인 것이라 할 수 있다.
- primer제작하고, PCR을 통해 원하는 부분의 DNA를 선택적으로 증폭시킨 후, electrophoresis(전기영동)을 통해 Band의 형태로 볼 수 있다. 전기영동은 agarose gel이나 polyacrylamide gel에 PCR 증폭산물을 loading하고, 전류를 흘려주어, 증폭산물이 전류를 따라 흘러, 증폭한 사이즈에 맞는 band의 형태를 확인하는 것을 말한다.
- PCR은 보통 25~ 35 cycle로 실시하는데, 30 cycle의 경우 2의 30 제곱만큼의 DAN가 증폭하게 된다. 즉 PCR을 통해 특정 부위의 DNA를 수 시간 내에 어마어마하게 증폭시킬 수 있으며, 이렇게 증폭된 DNA를 다음과 같이 여러 가지 실험에 이용할 수 있고, 실험 결과를 토대로 여러 의학적인 연구에 응용할 수가 있다.

▶ 중합효소 연쇄반응이 이용되는 실험
1) Probe로 사용할 목적으로 cloning된 이중가닥 DNA의 증폭
2) 적은 양의 mRNA로부터 특정 cDNA의 cloning
3) DNA sequencing
4) 돌연변이 검사
5) 병인성 바이러스 및 박테리아 검출
6) 유전자의 footprinting
7) 특정 부위에 돌연변이를 일으킨 유전자의 제조(site directed mutagenesis)

참고 자료

유민, 김병오, 이혜영.(2012). “미생물 실험서”. 보문각. (page 68-78)
권오식 외.(2012). “필수유전학”. 월드사이언스
https://bric.postech.ac.kr

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