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생물과학실험 핵산생화학 레포트

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최초 등록일
2015.05.14
최종 저작일
2014.05
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목차

1. Introduction

2. Results

3. Discussion

4. Assignment
1) Knockdown 실험이나 knockout system 이외에, Drosha가 miRNA의 biogenesis를 담당하는 enzyme이라는 것을 직접적으로 보여줄 수 있는 다른 실험은 무엇이 있을까?
2) Knockout과 knockdown의 장단점은?
3) CRISPR-Cas9 system과 TALEN system

5. References

본문내용

small RNA는 직접적으로 유전자 발현 과정에 관여하고 세포의 기능을 전체적으로 조정하는 역할을 하는데 그 종류로는 miRNA와 siRNA등이 있다. 그 중 miRNA(miRNA)는 21개에서 25개 정도의 nucleotide로 구성된 단일 염기가닥의 RNA를 말한다. miRNA는 발생시기와 cell proliferation, cell death, 그리고 신경세포로의 분화를 조절하는 등 진핵생물의 유전자 발현을 제어하는 역할을 한다. 핵 내에서 DNA는 PolⅡ의 도움으로 pri-miRNA(primary micro RNA)라는 긴 RNA로 전사된다. 이 pri-miRNA는 mRNA와 매우 유사한 구조를 갖고 있으며, 전두부에 cap구조를, 그리고 후미부에 Adenine을 다량으로 포함한 poly-A 구조를 갖고 있다. 이렇게 전사된 pri-miRNA는 그 후 RNaseⅢ type 단백질인 Drosha라는 효소와 DGCR8이라는 물질의 상호작용ㅡDGCR8이 RNA를 고정하면 Drosha가 그 RNA를 자른다ㅡ에 의하여 잘리게 되어 약 70개에서 90개의 뉴클레오티드로 구성된 stem-loop pre-miRNA가 된다. 이렇게 만들어진 RNA는 exportin-5라는 운반 단백질과 결합하여 cytoplasm으로 나가게 되고 Dicer라는 효소에 의해 잘리게 된다. 이 때 만들어지는 21개에서 25개의 뉴클레오티드로 구성된 짧은 길이의 non-coding RNA조각을 microRNA(miRNA)라고 한다. 이 miRNA가 Argonaute와 같은 여러 가지 단백질과 함께 RNA-induced silencing complex(RISC)를 형성하는데, 이 복합체는 post-transcriptional regulator으로서 전사 및 전사 후 단계에서 유전자 발현을 억제하는 기능을 한다. 특히 target 유전자와 결합하여 target mRNA를 분해하거나 단백질로 번역되는 과정을 억제한다.

참고 자료

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Susan Young, Precise and easy ways to rewrite human genes could finally provide the tools that researchers need to understand and cure some of our most deadly genetic diseases, MIT technology Review magazine, March/April 2014
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