그람염색 예비레포트

목차

1. Subject
2. Object
3. Principle & Theory
4. Apparatus & Reagents
5. Procedure
6. Reference books

본문내용

1. Subject
그람 염색 및 단순 염색

2. Object
Gram 염색에 의한 세균 감별 염색(Differential staining)방법을 익히고, 세균의 Gram 양성(Violet 색) 및 음성(적색)에 따르는 분류와 염색성의 원리, 방법, 기본 지식을 이해한다.

3. Principle & Theory
살아 있는 미생물을 광학 현미경으로 직접 관찰하는 방법이다. 이 방법은 미생물의 실제의 형태, 크기 및 운동성 여부를 관찰하는데 유용하며 관찰 방법은 현적 표본 방법으로 관찰 한다.

현미경
미생물은 작고 투명해서 이들을 관찰하는 데는 반드시 현미경이 필요하다. 현미경은 수백 배에서 수십만 배까지 확대할 수 있으므로 박테리아의 형태나 내부구조까지도 볼 수 있다. 현미경은 광학현미경과 전자현미경으로 크게 두 종류가 있다.
광학현미경은 광학렌즈의 계통에 따라 명시야현미경(보통 현미경), 암시야현미경, 형광현미경, 위상차현미경 등으로 나눈다. 보통현미경은 구조적 특성상 1,000배 이상은 확대하기 어려운데, 그 이유는 광학현미경은 파장이 긴 가시광선을 사용하고 광학렌즈의 기능적 특성으로 해상력에 한계가 있기 때문이다. 만일 고성능 접안경을 접안렌즈에 부착하여 사용하면 2,000배까지도 확대가 가능하나 그 이상은 어렵다.

<중 략>

이는 균 세포벽에 magnesium ribonucleate의 유무에 따라 좌우되는데 Gram 음성균은 이 물질이 없기 때문에 탈색이 되어 무색으로 다시 환원한다. 반대로 Gram 양성균은 세포벽에 있는 magnesium ribonucleate가 탈색제의 작용을 차단하여 crystal violet 색소의 탈색을 억제하여 세포벽은 violet색으로 남게 된다는 것이다.
Gram염색 과정 중 가장 주의해야 할 점이 탈색제의 사용이며 그 적용시간이다. 만약 탈색제 적용 시간이 지나치게 길면 Gram 양성 세균이 Gram 음성으로 보일 수 있기 때문이다.
끝으로 대비 색소(counter stain)로 쓰이는 safranin O는 일단 탈색된 세균 세포벽에 착색되어 적색으로 보이게 된다. 이와 같은 균종을 Gram 음성균(Gram negative organism)이라고 한다.

참고 자료

최호형(2004), 미생물학, 아카데미 서적, p.18~20(이하 그림 1-5, 1-6, 1-7, 1-8 포함)
최호형(2004), 미생물학, 아카데미 서적, p.20~23(이하 그림 1-9, 표 1-1 포함)
방병호, 박헌국, 심상국 외 5명(2002), 미생물학 실험, 진로연구자, p.23~24
오계헌, 강형일, 소재성 외 2명(2010), 최신 미생물 실험, 신광문화사, p.48
방병호, 박헌국, 심상국 외 5명(2002), 미생물학 실험, 진로연구사, p.231~233
방병호, 박헌국, 심상국 외 5명(2002), 미생물학 실험, 진로연구자, p.24
사이언스올 과학백과사전, '1.고초균~3.대장균' (그림 포함)
http://www.scienceall.com/dictionary/dictionary.sca?todo=scienceTermsView&classid=&articleid=247282&bbsid=619&popissue
김충환(2004), 밀레니엄 미생물학, 정문각, p.41