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혈약 DNA로부터 SRY 유전자 확인

교육
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최초 등록일
2014.01.21
최종 저작일
2013.10
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소개글

혈약 DNA로부터 SRY 유전자 확인 결과리포트 논문급내용 에이플러스받은 리포트

목차

1. 제목
2. 목적
3. 실험방법
4. 결과
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

1. 제목: 혈약 DNA로부터 SRY 유전자 확인

2. 목적: 성결정 유전자인 SRY유전자를 확인하고 혈액으로부터 DNA를 추출할 수 있으며 추출 된 DNA에서 목적하는 DNA를 증폭하여 PCR의 원리를 이해하며, 전기영동으로 확인한다.

3. 실험방법

[1] 실험 재료 및 기구

(1) 혈액 DNA 분리
혈액, RBC lysis buffer, microtubube, SPK, iso-prophanol, 70% EtOH, 원심분리기, Nuclease Free DW, Phenol : Chloroform : iso-Amyl alchol = 25 : 24 : 1 용액, NaOAc

(2) Polymerase Chain Reaction
혈액에서 분리한 DNA, Primer, 10xPCR buffer, dNTP mix, up-primer, down-primer, Taq pol.(5unit/㎕), ddH₂O

(3) Electrophoresis
1.5% agarose gel, Marker(Bioneer 100 bp Plus DNA Ladder), EtBr(Stock 10mg/ml Final 0.5㎍/ml)

[2] 실험방법

(1) 혈액 DNA 분리
① 혈액 300㎕를 microtubube에 넣는다. (Tip을 자르고)
② RBC lysis buffer를 1ml 첨가하고 상온에서 3분 방치한다.
③ 상온에서 6000 rpm, 10분간 원심분리한다.
④ 상층액을 제거한다.
⑤ 500㎕의 SPK를 넣고 잘 섞어준다. (SPK는 사용 전 37℃에서 미리 데워준다.)
⑥ 37℃에서 30분 이상 충분하게 반응시켜준다.
⑦ Phenol : Chloroform : iso-Amyl alchol = 25 : 24 : 1 용액을 동량 첨가 후 섞어준다.

<이하생략>


참고 자료

정해영. 2000. 유전자와 DNA의 최첨단. 월드사이언스. 40~42
http://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%A4%91%ED%95%A9%ED%9A%A8%EC%86%8C_%EC%97%B0%EC%87%84_%EB%B0%
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1048183&cid=128&categoryId=128

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