생화학 실험 결과 보고서

소개글

recombinant plasmid,trasformation,plasmid mini prep,agarose gel electrophoresis 실험에 대한 결과 보고서 입니다.

목차

Ⅰ. growth media, recombinant plasmid 만들기

1. subject
2. date & section
3. objective
4. method
5. result
6. discussion

Ⅱ. com cell 만들기와 trasformation

1. subject
2. object
3. method
4. result
5. discussion

Ⅲ. plasmid mini prep, agarose gel electrophoresis

1. subject
2. object
3. method
4. result
5. discussion

본문내용

1. subject
growth media, recombinant plasmid 만들기

2. date & section
2011. 10. 20

3. objective
미생물 배양에 이용되는 다양한 배지와 역할에 대해 배워보고, 직접 제조해 봄으로써 생화학 실험에 대한 기초적인 태크닉을 배워본다.

4. method
*제한효소 처리과정
① heating block 을 37℃ 에 맞춘다
② ep tube 에 다음과 같이 준비한다.

<중 략>

1. subject
com cell 만들기와 trasformation

2. object
target DNA 를 plasmid 에 삽입하고, 제조합된 plasmid 를 대장균에 넣어 대장균의 유전자형을 바꾼다.

3. method
competent cell 만들기
①배양한 E.coli 의 OD 값이 600nm에서 0.6 인지 확인
②ice에서 10분
③E.coli 를 4500rpm 으로 10분간 centrifugation
④supernatant 제거후 CaCl2 0.1M 을 원래부피의 1/2(=500㎕)넣고 약하게 resuspension
⑤ice에서 15분

<중 략>

* agarose gel electrophoresis
① 0.5g 의 agarose에 0.5x TBE buffer 50ml를 넣어 녹인다.
② 랩으로 싸서 전자레인지 이용. 1분 30초간 가열한다.
③ 4㎕ EtBr 용액을 첨가한다.
④ 5분 정도 식힌 후에 gel tray에 붓는다.
(기포가 생기면 절대 안됨)
⑤ comb를 꽂고 기다린다.
⑥ 0.5x TBE buffer를 gel tank 에 2~5mm정도의 깊이가 되도록 붓는다.
⑦ tank 안에 gel 을 장착하고 sample을 loading 한다. (marker포함)

참고 자료

없음