생화학실험 결과보고서 세포배양

최초 등록일
2018.10.11
최종 저작일
2016.12
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목차

1. 실험목적
2. 시약 및 기구
3. 실험방법
4. 실험결과
5. 실험토의

본문내용

1. 실험목적
E.coli (대장균)을 배양하면 미생물의 동정 및 환경요인과 미생물의 관계 등을 알 수 있다. 따라서 배지의 제조 방법을 이해 한 후 E.coli의 배양에 가장 적합한 배지를 만들어 배양해본다.

2. 시약 및 기구
1) 시약(reagent)
LB 배지 (Luria Bertani), 증류수, Ampilcillin , Agar
2) 기구(apparatus)
: 원심분리기(Centrifugal separator), 페트리 접시(plate), 알코올램프 (alcohol lamp), conical tube, tip, 배양기(incubator), 마이크로피펫, EtOH(소독용), e-tube, 호일, 500ml 삼각플라스크 2개

3. 실험방법
1) LB medium (Liquid) & LB agar plate (Solid)
①. LB medium : LB broth 2g + 증류수 100ml를 500ml 삼각플라스크에 넣고 흔들어서 섞어준다.
LB agar : LB broth 2g + Agar 1.5g + 증류수 100ml를 500ml 삼각플라스크에 넣고 마그네틱바를 넣은 뒤 충분히 stirring 시킨다.
② 각 삼각플라스크 입구를 호일로 덮고 121C, 15min (총 120min) 조건으로 고압멸균(Autoclave) 한다.
※ 고압멸균 할 때 50ml conical tube 2개를 뚜껑 열고 비커에 담아 같이 넣어준다.
③ 고압멸균이 끝나면 목장갑을 끼고 삼각플라스크를 꺼내어 식힌다. (만졌을때 뜨겁지 않은 정도)
④ 테이블 주변을 알코올로 닦고, 알코올램프를 켠다.
⑤ LB agar plate 배지 100mL에 100L ampicillin(1mg/ml)을 넣은 뒤 5개의 Petri dish에 붓는다.
⑥ plate가 굳으면 뒤집어서 뒷면에 LB(Amp)/분반/조를 적어둔다.
⑦ LB medium은 고압멸균 한 50ml conical tube 2개에 나눠 담아 LB/분반/조를 적어둔다.

참고 자료

없음

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