Bradford 법에 의한 단백질 정량

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최초 등록일: 2012.02.10
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Bradford assay를 이용한 단백질 정량 실험 결과 및 고찰 입니다.

a. 분광광도계를 이용한 BSA와 미지시료의 흡광도 결과값
b. Standard curve
고찰

1. 적정곡선 그리고, Q1~Q4의 농도를 예측하세요.
2. Q1~Q4 가 적정곡선을 그린 알부민 단백질이 아닐 경우, 농도를 정확하게 예측할 수 있겠는가?
3. Q1~Q4 단백질이 다른 단백질을 경우, 본 실험에서 어떤 부분들을 고려해야 할 것인가? Bradford assay의 한계점과 관련하여 고찰할 것.
4. 3의 경우, 어떤 실험방법을 통해 단백질을 정량 할 수 있겠는가?

본문내용

단백질을 빨리 정량할 수 있는 Bradford 정량법으로 미지의 단백질 시료를 정량한다.

Bradford assay는 CBBG (Coomassie Brilliant Blue G-250)의 protein과의 배위결합을 통한 최대 흡광도의 변화를 기초로 한다. 산성용액에서 CBBG염료는 red form (cationic dye, unbound form)을 띠며 단백질과 결합 시 blue form (anionic dye, bound form)으로 전환된다. 이때 염료와 결합한 protein은 염료로부터 전자를 받아서 hydrophobic (양이온화)하게 변성된다.

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