[생화학]단백질 전기영동

*병*
최초 등록일
2010.12.30
최종 저작일
2010.05
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생화학 단백질 전기영동 실험 과정 결과 및 디스커션입니다.

목차

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본문내용

1.title : 단백질 전기영동
2.Date : 2010. 10. 11
3.Name :
4.Reagent : 2x sample buffer, pipette, microtube, 동동이, water bath
5.method : 생략
6.Result
7.Discussion
1.2x sample buffer의 역할?
완충용액은, 용액의 pH를 일정하게 유지하여, 단백질을 외부 환경으로부터 안정적으로 유지 시켜준다.
2. 단밸질 샘플을 끓이는 이유는?
SDS-PAGE 의 과정을 살펴보면 우선 단백질 샘플을 Loading buffer 와 섞어준 다음 gel 에 주입해야 하는데, loading buffer 에는 SDS가 포함되어 있습니다. 이 SDS 가 단백질을 둘러싸 micelle 을 형성하면 둘러싸인 단백질은 단백질의 사이즈에 비례하는 전하를 가지게 된다.
이때 size 와 둘러싸이는 전하의 양, 즉 SDS의 양을 일치시키려면 꼬여있는 단백질을 일자로 쫙 풀어주어야 오차가 적어진다. 단백질이 아주 많이 꼬여있으면 실제 분자량보다 크기가 작아져 SDS 가 많이 둘러싸지 못해 원래보다 작은 분자량에서 나타나게 된다.
즉, SDS 가 단백질을 둘러쌓아서 단백질 크기에 비례하는 전하를 띄게 해줘야 하는데, 단백질이 꼬여있으면 안쪽에는 SDS 가 침투하지 못하므로 가열을 통해 단백질을 풀어줌으로써 SDS 가 단백질의 크기에 비례하여 둘러쌓을 수 있게 해주는 것이다.
3.단백질 크기에 따라 gel농도가 달라져야 하는 이유는?
Acrylaminde를 가교제로 중합한 polyacrylamide gel을 이용하는데 acrylamide와 가교제의 농도 및 비율에 의해 gel내 미세통로의 크기를 조절한다.따라서 다양한 크기의 생체 분자들을 분리 할수 있다.

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