Ion-exchange chromatography
- 최초 등록일
- 2010.03.04
- 최종 저작일
- 2010.03
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소개글
Ion-exchange chromatography & dialysis 생화학 레폿
목차
1. Introduction.
2. Materials & Methods
3. Result.
4. Discussion.
5. reference
본문내용
1. Introduction.
지난 실험은 U.V.spectroscopy, Lowry Assay, Bradford Assay 등의 방법을 이용해서 protein의 농도를 측정하는 실험이었다. 이번 실험은 protein charge에 기초한 ion-exchange chromatography 방법을 이용해서 protein purification을 하는 것이다.
BACK GROUND
1) Ion exchange chromatography
Ion exchange chromatography는 각종 단백질의 전하량과 충진제의 이온 상호작용의 차이에 따라 단백질을 분획하는 방법이다. 어떤 pH에서 서로 다른 net charge를 가진 protein을 anion exchanger와 함께 넣어준다면 음의 net charge를 가진 protein은 anion exchanger에 binding 되고, 양의 net charge를 가진 protein은 binding되지 않는다. 그리고 washing step을 거쳐주면 nonspecific 하게 붙은 positively charged protein 이 씻겨나온다. 그리고 pH를 낮추거나 ionic strength를 증가시켜 주면 negatively charged protein도 점점 positively charged로 바뀌면서 elution되어 나온다. 그로 인해 우리는 protein의 charge 정도에 따라 protein을 purification할 수 있다.
참고 자료
Biochemistry lab manual, lab 4.