생화학실험(2) - Sub-Cloning (2) : Restriction Mapping of Circular Plasmid DNA and Transformation of ligated Plasmid DNA

소개글

restriction mapping을 통해 미지의 DNA에서 제한효소 절단 부위의 상대적인 위치를 알아보고, ligation한 plasmid를 bacteria에 transformation 해본다.

목차

◆ 실험일자
◆ 제출자
◆ 목적
◆ 원리
◆ 시약 및 기자재
◆ 방법
◆ 결과
◆ Discussion
◆ 참고문헌

본문내용

◆ 실험일자 : 2009년 3월 27일 금요일
◆ 제출자 :
◆ 목적 : restriction mapping을 통해 미지의 DNA에서 제한효소 절단 부위의 상대적인 위치를 알아보고, ligation한 plasmid를 bacteria에 transformation 해본다.
◆ 원리
* Restriction mapping
큰 DNA의 sequence analysis를 하기 전에 DNA 분자 상에서 위치를 알려주는 이정표와 같은 것을 정하는 예비적인 과정이 필요하다. 물리적 특성을 토대로 만든 지도를 physical map이라고 부르는데, 물리적 지도 중 제한효소 부위가 유일한 표식으로 관여한다면, 이것을 제한효소 지도 (restriction map)라고 한다. 즉, Restriction map이란 DNA sequence 상에서 제한효소 절단부위들의 상대적 위치를 뜻하고, 이러한 위치를 결정하는 과정을 Restriction mapping이라 한다. 제한효소에 의해 절단되는 부위에 대한 정확한 map의 작성은 이후의 모든 유전자 조작실험에 있어서 중요한 정보를 제공해준다. Restriction mapping 은 제한효소에 의해 DNA의 특정 염기서열이나 그 부근이 절단된다는 것과 (관심 있는 DNA에 여러 종류의 제한효소를 단독 혹은 조합으로 처리하여 자름) 그 결과 생성된 DNA 절편의 크기를 gel electrophoresis에 의해 결정할 수 있다는 원리를 바탕으로 실행할 수 있다. 원래는 cloning이 잘 되었는지 확인하는 과정으로 사용되지만, 이번 실험에서는 미지의 plasmid의 restriction site를 알아보기 위해 실험한다.

참고 자료

없음