분자생물학 실험

소개글

분자생물학 수업에서 실험레포트 입니다.

목차

실험1. Pure culture & Medium (Reagent)
실험2. Alkaline lysis방법에 의한 plasmid DNA분리 (small scale)
실험3. Alkaline lysis방법에 의한 plasmid DNA분리(large scale)
실험4. Preparation of Chromosomal DNA from Bacillus
실험5. DNA elution & ligation

본문내용

실험1. Pure culture & Medium (Reagent)
⓵요약
미생물의 여러 가지 특성을 조사하기 위해서는 반드시 단일 종의 미생물을 분리해 내야하며 단일 종의 미생물을 분리하는 방법에는 획선법(streaking method), 도말법(spreading method), 평판 주입법(puring method)이 있다. 이 실험에서는 획선법과 도말법을 이용하여 단일 종의 미생물을 분리해낸다.

⓶서론
-획선법(streaking method) : 도말평판법, 멸균된 백금이에 분리하고자 하는 미생물의 시료를 묻혀 고체배지의 한쪽에서부터 시작하여 점진적으로 도말하는 방법이다.
한쪽에서 점진적으로 도말하면 inoculum이 차츰 희석되어 마지막 도말 부위에서 하나의
세포만을 얻어 배양할 수 있다.
-도말법(spreading method) : 표면도말법, 미생물이 함유된 한 방울의 현탁액을 고체배지
위에 멸균된 유리막대로 펼치는 방법이다. ...



<10월 16일 실험한 Ligation Test>
첫 번째가 Vector DNA band
두 번째가 2조 Vector와 5조 Insert의 Elution band
세 번째가 Ligation후의 band
이론으로 배운 결과와 다른 band가 나온걸 보면 ligation이 잘되지 못 한 모양이다. band가 길게 늘어져 정확한 선의 위치를 찾기 어렵다. 이렇게 band가 늘어진 것은 DNA만 있는 것이 아니라 다른 불순물들 이 포함되어 있기 때문이다. 그래도 elution band는 선이 뚜렷하게 보인다. 이렇게 선명한 band가 나온 것은 colony가 많아서이며, colony가 많을수록 효율성이 좋다.
대부분의 조에서 band가 선명하게 나오지 않았기 때문에 우리조만 실험결과가 나쁘게 나오지 않은 것 같아 다행이었다.
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참고 자료

연세대학교 의과대학 생화학-분자생물학교실 및 유전과학연구소 홈페이지
야후 지식검색, 네이버 지식인
실험노트, 강의 프린트
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/DNA_ligation.php