표준평판계산법을 통한 E. coli 표준 곡선(Standard Curve) 잡기

소개글

액체배양 및 평판배양, CFU 측정 등의 표준 평판 계산법 이론 및 standard curve 잡는 실험 절차와 결과.
표와 그래프가 수록된 실험 예비 and 결과 리포트.

목차

1. 이론
2. 실험 재료 및 절차
- 배지 제조
- 균의 접종 및 배양
3. 결과 및 토의
4. 요약
5. 참고자료

본문내용

형성된 집락의 단위는 C.F.U.(colony forming unit)로 표시하며, 반드시 희석배율이 명시
되어야 한다.(3)(5) 이와 관련된 문헌을 살펴보면 이 방법은 미국 보건성에서 우유의 세균수
측정에 이용하도록 법령으로 정하고 있으며 시료를 계단 희석하여 한천배지와 혼합분주하고
배양기에서 24～48시간 배양하고 관찰하는 방법이다.(1)
본 실험의 목적은 미생물이 일정한 물질의 양에 따라 집락의 단위 C.F.U를 측정하고
standard curve를 그려 봄으로써 그 시료내의 미생물의 수를 예측해 보는 것이다. 1개의 colony가 1개의 세포로부터 형성된 것으로 간주하여 colony의 수로부터 균액 중의
생균수를 산출한다. 단, 사용하는 배지조성에 따라서 발육하지 않는 균도 있으므로 배지의
선택에는 주의를 기울이고 pH, 배양온도, 배양시간 등의 배양조건도 계수하고자 하는 모든
균종에 대해서 충족되어야 한다.(4)

(fig. 3)는 (fig. 2)과 다르게 그래프 값에 O.D값이 0일 때 C.F.U도 0으로 가정하여 값을
하나 더 추가한 것이다.

(fig. 3) E. coli의 standard curve

(fig.4)는 (fig. 3)에 추세선을 추가한 것으로 각각의 점에서 가장 근접한 직선을 그었고,
직선의 기울기는 413.57, R² = 0.5404 이다. 이 대장균의 standard curve를 통해 알 수
있는 사실은, 특정 균주의 standard curve를 정확히 작성해 놓으면 후에 반복실험이나
다른 실험 시에 O.D. 값만 측정하면 매번 평판배양을 하지 않고도 생균수를 추측할 수
있다.

참고 자료

미생물학 실험 저자 김영권 고려의학도서출판(1994) (p. 218)
미생물학 실험서 저자 김종협 삼일각출판 (1975) (p. 48~49)
등등...