plasmid DNA 추출방법 중 akaline lysis 에 사용되는 시약조성,역할

소개글

plasmid DNA 를 추출하기 위해 사용되는 방법 중 akaline lysis 에 사용되는 시약의 조성과 역할에 대하여 조사 정리하였습니다.

목차

LB broth with antibiotics
STE buffer
alkaline lysis buffer Ⅰ
alkaline lysis buffer Ⅱ
alkaline lysis buffer Ⅲ
3M sodium acetate
PCI solution
70% EtOH
100% EtOH
elution buffer

본문내용

LB broth with antibiotics : bacteria를 배양하기 위한 액체배지이고 antibiotics는 실험자 가 원하는 plasmid를 얻기 위해 사용된다. antibiotics는 vector 에 존재하는 antibiotic resistance gene 에 따라 결정된다.
① 10 grams tryptone
② 5 grams of yeast extract
③ 10 grams of NaCl
④ Dissolve in 1 L of water


STE buffer : NaCl이 genomic DNA를 변성시키고 TE buffer는 buffer로써의 역할을 한 다.
① 10 mM Tris-Cl (pH 8.0)
② 0.1 M NaCl
③ 1 mM EDTA (pH 8.0)


alkaline lysis buffer Ⅰ : EDTA를 첨가하여 cell wall의 Mg2+를 chelating 하여 cell wall을 깨지기 쉬운 상태로 만들어 준다. cell이 깨지지 않게 하 기 위해 glucose로 삼투압을 유지시킨다.

참고 자료

없음