[미생물 염색법] Gram Stain

소개글

식품미생물학 실험자료입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 원리
3. 실험 기구및 기기
4. 실험 방법

본문내용

1. 실험 목적
: 세균의 동정, 분류의 중요한 지표인 그람 양성균과 음성균을 구분하고 동시에 분별 염색의 원리와 조작법을 습득한다.

2. 실험 원리
: 분별염색은 열고정된 도말표본에 적어도 세 가지 이상의 염색시약을 사용하여 이루어진다.
먼저 1차 염색시약(Primary stain)으로 균체를 염색하고 2차 염색시약과의 대비를 보이기 위해 탈색제(decolorizing agent)를 쓴다. 이 때 세포 구조물질의 성질차이에 의해 1차 염색시약이 제거되기도 하고 되지 않기도 한다. 그리고 2차 염색시약 혹은 대응 염색시약(Counter stain)으로 염색하여 1차 염색시약과 대비되는 색을 나타낸다. 즉 1차 염색 후 탈색된 균체는 2차 염색시약에 의해 염색이 되지만 탈색되지 않는 균체는 2차 염색 시약을 흡착하지 못하고 그대로 1차 염색시약의 색깔을 유지하게 된다. 이러한 분별염색을 세균이 응용한 가장 중요한 염색법이 그람염색인데 이는 1884년 Christian Gram에 의해 고안되어 명명되었다. 어느 세균 세포벽의 성분 조성에 따라 그람 양성균과 음성균으로 나누어지고 그람 양성균에는 대부분의 구균과 유포자 간균이 그람 음성균에는 대부분의 간균이 속하고 있다.
그람 염색에는 4가지 시약이 사용되고 그 원리는 다음과 같다. 먼저 1차 염색시약으로 Crysta violet의 염기성 시약을 사용하며 이에 의해서 모든 세포는 보라색으로 염색된다. 그 다음 crystal violet시약을 세포에 강하게 고정시키기 위해 매염제(Mordant)로 Gram's iodin시약을 사용한다. 이는 1차 염색시약과 결합하여 불용성 화합물인 Crystal violet-iodine(CVI) complex를 형성하여 세포에 더욱 강하게 고정시키며 모든 세포는 짙은 자줏빛을 띄게 된다,

참고 자료

없음