[생명과학실험]Gram Staining

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항
7. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
가. 그람 염색의 화학적, 이론적 기초를 파악하고 그람 양성과 음성의 박테리아를 구분할 수 있다.
나. 그람염색을 통해 미생물을 그람양성과 그람음성으로 분류한다. 그람염색을 통해 미생물을 분류할 수 있다.

2. 실험 이론 및 원리
가. 그람염색법의 원리
그람 염색을 하기 위해선 관찰하고 싶은 세포에 염색액을 묻힌 후 요오드용액처리를 한다. 그 후 에탄올로 세포를 씻게 되면 조직은 탈색되지만 균은 탈색되지 않고 자주색(염색액의 색)으로 보이게 된다. 자주색으로 균이 보이게 되기 때문에 그람염색법을 이용하여 균을 관찰할 수 있었다. 하지만 에탄올 처리 과정에서 특정균의 경우에는 탈색되는 경우가 있다. 그래서 그람염색을 할 때 에탄올 처리 과정에서 탈색 되지 않는 세균을 그람 양성균이라 하고 탈색되는 균을 그람 음성균 이라고 한다.

나. 그람 양성균과 그람 음성균의 구분방법
그람염색은 분별염색이라고 한다. 분별염색이란 세균의 식별을 용이하게 하기 위해 두 가지 이상의 생물학적 염료를 사용하는 방법이다. 그람 양성균의 경우에는 보통 크리스탈 바이올렛 염색액에 의해 염색이 된다. 그래서 그람 양성균의 경우에는 에탄올로 씻더라도 염색된 색이 탈색되지 않기 때문에 자주색(보라색 계열의 색)을 뛰게 된다. 그람 음성균의 경우에는 에탄올로 인해 크리스탈 바이올렛 염색액이 탈색되므로 또 다른 염색액으로는 사프라닌 염색액을 사용한다. 사프라닌 염색액을 사용하게 되면 그람 음성균의 경우에는 붉은색을 뛰게 되면서 그람 양성균과 그람 음성균을 비교할 수 있다. 그람 양성균의 경우에는 크리스탈 바이올렛 염색액이 사프라닌 염색액 보다 더 색이 진하므로 두 번째 염색약인 사프라닌 염색액의 색에 영향을 받지 않는다.

참고 자료

생명과학, Roven , 녹문당, 2008, p.384～388
장인호, 송원근, 어 영, 윤갑준, 이경원, 정윤섭. 혐기성 세균의 분류를 위한 KOH 검사와 항균제 감수성 검사의 평가. 임상병리와 정도관리 1993:15;157-62.