생화학실험, 단백질 정량, 단백질 전기영동, gel staining, western blot 실험보고서

소개글

생화학실험인 단백질 정량, 단백질 전기영동, gel staining, western blot 실험보고서 입니다
평가 결과 만점 받은 실험보고서입니다.
많은 참고 바랍니다.

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험결과
4. 이론 및 고찰
5. 참고문헌

본문내용

5)실험을 통하여 얻은 결과를 설명하시오.
BSA 표준 단백질의 흡광도 측정 결과 BSA의 양을 1㎍, 2㎍, 3㎍, 4㎍, 5㎍으로 하였을 때 흡광도의 평균값은 0.3322, 0.373, 0.3475, 0.3855, 0.394로 점차 증가하였다. 첨가하는 BSA의 양이 3㎍, 4㎍, 5㎍였을 때에는 1차 흡광도 측정값과 2차 흡광도 측정 값이 유사하게 나온 반면에 BSA의 양이 1㎍와 2㎍이었을 때에는 1차 흡광도 측정값과 2차 흡광도 측정 값이 차이가 크게 나왔다. 이로 인해 BSA 표준 단백질의 흡광도-단백질 농도 그래프를 그렸을 때 그래프의 모양이 예상한 것과 다르게 이상한 커브 형태를 나타내었고 추세선을 기준으로 하였을 때 심하게 벗어난 모습이었다. 신뢰도가 떨어지는 BSA의 양이 1㎍와 2㎍이었을 때의 흡광도 측정값을 제외한 그래프를 그려보면 추세선과 잘 맞아 떨어지며 커브가 없는 정상적인 곡선이지만, 데이터의 범위가 작아지기 때문에 앞의 두 측정값을 포함하여 그래프를 그린 것을 단백질 정량분석 하는데 사용하였다.
단백질의 농도는 BSA 표준 단백질의 흡광도-단백질 농도 그래프의 2차 방정식 수식에 대입하여 계산하였다. 2차 방정식은 y = 185.94x2 - 87.495x + 10.061이고 이때 X는 흡광도, Y는 단백질의 농도를 의미한다.
시료의 흡광도 측정 결과 근원세포(0h)는 1차 측정 때는 0.291, 2차 측정 때에는 0.279이었고 두 값의 차이가 적었으며 평균값은 0.285이었다. 근관세포(96h)는 1차 측정 때는 0.314, 2차 측정 때에는 0.325이었고 두 값의 차이가 적었으며 평균값은 0.3195였다.
근원세포의 흡광도의 평균값이 0.285로 측정되었으므로, 단백질의 농도는 185.94×〖0.285〗^2-87.495×0.285+10.061=0.228(㎍/μl)이었다. 근관세포의 흡광도의 평균값이 0.3195로 측정되었으므로, 단백질의 농도는 185.94×〖0.3195〗^2-87.495×0.3195+10.061=1.087(㎍/μl)이었다.

참고 자료

Wikipedia, “ponceau S”, < http://en.wikipedia.org/wiki/Ponceau_S >
Wikipedia, “Bromophenol blue”, < http://en.wikipedia.org/wiki/Bromophenol_blue>
“Chemiluminescence”, 『생명과학대사전』, 한국생물과학협회.박상대, 분자세포생물학, 아카데미서적, 1998, p.15.
Eric P. Widmaier, Hershel Raff, and Kevin T. Strang, Vander’s Human Physiology, McGrawHill, 2009, p.286~287.
Reece, Urry, Cain, Wasserman, Minorsky, and Jackson, Campbell Biology, Pearson, 2012, p.1103~1112.