[A+] 서강대 현대생물학실험1 효소

소개글

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목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials and Methods
4. Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

효소의 활성이 온도나 pH에 따라 bell-shape 개형을 나타내는 이유를 살펴보자. 먼저, 온도의 관점에서, 최적 온도에 도달하기까지 반응속도는 증가하였다. 이는 속도상수를 표현하는 식인 아레니우스 식으로 설명할 수 있다. k=A〖∙e〗^(-〖∆G〗^‡/RT)에서 절대온도 T가 증가할수록 속도 상수 k가 증가하는 것을 볼 수 있으며, 따라서 반응속도가 증가한다. 그러나, 최적 온도 이상의 온도에서는 단백질 변성으로 인해 활성 부위의 구조와 효소 작용에 관여하는 아미노산 잔기들의 위치가 변화하여 반응속도가 급격히 감소하게 된다. pH의 관점에서는 최적 pH에서 최대의 활성을 나타내도록 아미노산들이 적절한 이온화도 조합으로 특정 구조를 이루었다고 볼 수 있으며, 최적 pH에서 양쪽으로 멀어질수록 활성부위를 이루는 아미노산의 이온화도가 변화하여 구조가 달라지므로 활성이 감소한다.
본 실험에서는 반응의 종결로 강염기인 Na2CO3를 이용하였는데, pH의 증가로 활성 부위의 이온화도가 변화하여 효소가 활성을 잃어 반응이 종결되었다고 볼 수 있다. Na2CO3 첨가에 따른 pH의 변화를 살펴보자. NaH2PO¬4의 pKa는 7.21이고[8], Henderson-Hasselbalch 식에 의해 pH=pKa+log(([HP〖O_4〗^(2-)])/([H_2 P〖O_4〗^-]))을 만족하므로, 7.3=7.21+log(([HP〖O_4〗^(2-)])/(〖[H〗_2 P〖O_4〗^-]))에서 ([HP〖O_4〗^(2-)])/([H_2 P〖O_4〗^-])=1.2이다. Sodium phosphate가 버퍼 수용액에서 해리된 후, phosphate의 총 몰수는 0.1 M × 800 ul = 80 umol이므로, pH 7.3에서 HPO42-는 44 umo

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