[유전공학] C4. 효소와 전기영동 정리본

소개글

유전공학 시험대비해 4단원 효소와 전기영동 을 정리한 자료입니다.

추천합니다

- 전공책이 없는 사람
- 전공책을 읽어도 머릿속에 정리가 안 되는 사람
- 자세하게 공부하고 시험보고 싶은 사람

목차

1. 유전자 조작과 분석에 필요한 효소
2. 전기영동

본문내용

1. 유전자 조작과 분석에 필요한 효소
1) 핵산분해 효소

exonuclease
① S1 뉴클리에이즈 (exo, endo 둘다)
-단일가닥 핵산 분해
-이중가닥 dna, dna-rna 혼성체, 이중가닥 rna에 저항성을 가짐, but 많은 양의 효소를 오래 처리 시 이중가닥 핵산도 절단
-이중가닥 cDNA 합성과정에서 생성되는 머리핀 구조를 제거
-제한효소로 절단된 DNA의 단일가닥 점착성 말단을 이중가닥 말단체로 만드는데 사용

② Mung bean 뉴클리에이즈
S1과 유사하나 훨씬 약한 촉매 기능
-단일가닥 DNA의 5‘말단에 작용하여 하나의 뉴클레오타이드, 올리고뉴클레오타이드로 분해하는 기능을 가짐.

③ exonuclease Ⅲ
이중가닥 dna의 3′말단으로부터 차례로 뉴클레오타이드를 하나씩 제거
- 선형의 이중나선 DNA, 틈을 가지는 원형 DNA에 작용

+ RnaseH기능 및 3′말단을 제거하는 탈인산화효소, 탈퓨린화된 dna에 특이적인 핵산내부분해효소

④ Bal31 뉴클리에이즈
- 단일가닥, 이중가닥의 dna 말단 부위를 시간에 따라 일정한 길이로 절단
- 프로모터 결손 분석에 이용
- 클로닝하기 전 필요없는 dna 말단을 제거하는데 이용
- 이중가닥, 단일가닥 모두 절단 가능
- 단일가닥 dna 3′말단 부위를 자름
- 약하지만 내부분해효소의 기능 존재

endonuclease
① Dnase Ⅰ
- 단일가닥 및 이중가닥 dna 모두에 작용
- 촉매반응에 칼슘, 마그네슘, 망간 등 2가 금속이온 필요

② 제한효소
1) 제한작용
작용 발견: 1950년대 루리아와 베르타니
효소 발견: 1962년대 린과 아버

대장균 균주: b균주, k균주,0157

2) 제한효소의 작용 메커니즘
-제한효소의 dna 인식 및 절단 부위는 palindrome을 가진다.
sticky end: EcoRⅠ, SacⅠ
blunt end: SmaⅠ

3) 제한효소의 종류
Ⅱ형: 인식부위와 절단부위가 일치
속명, 종명, 균주명

참고 자료

유전공학의 이해 제 3판 4단원 효소와 전기영동