[생화학실험]Elastase 저해 활성 평가

소개글

"[생화학실험]Elastase 저해 활성 평가"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 이론 및 원리
1) 실험 배경
2) 엘라스틴(Elastin)
3) 엘라스타아제(elastase)
4) 펩타이드 결합(Peptide bond)
5) 효소(enzyme)
6) 효소의 촉매 기전
7) 효소-기질 복합체

3. 실험 기구 및 시약
1) 실험 기구
2) 실험 시약

4. 실험 방법
1) 실험 과정

5. 실험 결과
1) 결과 DATA
2) 실험과정 중 2번, 4번 과정
3) Ursolic acid 시료 제조 과정(연속 희석법)
4) N-Succinyl--P-nitroanilide 6.25mM 제조 과정

6. 토의 사항
1) 실험 고찰

본문내용

1. 실험 목적
펩타이드는 단백질 성분으로, 길고 짧은 아미노산으로 구성되어 있다. 단백질층을 쌓아주는 역할을 한다. 대부분의 펩타이드는 수분 결합(수분을 끌어들이는) 기능을 한다. 그리고 이론적으로는 피부 손상을 복구하라고 명령하는 세포 대화 성분이다. 이러한 이유로 주름개선효과를 내고 싶다면 펩타이드의 분열을 저해해야 한다. 펩타이드의 분열을 저해하는 방법 중 하나는 펩타이드 결합의 분열하는 과정에서 촉매역할을 하는 효소인 Elastase를 저해하는 것이다. 실험을 통해 분광광도계를 이용한 Elastase 활성 저해를 측정한다.

2. 실험 이론 및 원리
2.1. 실험 배경
Elastase는 N-succinyl-(Ala) _{3}-P-nitroanilide의 펩타이드 결합 분열의 촉매역할을 하는 효소이다. 그러므로 Elastase의 활성을 저해시키면 펩타이드 결합의 분열이 억제된다. Elastase와 N-succinyl-(Ala) _{3}-P-nitroanilide가 효소-기질 복합체를 형성할 때 노란색을 띠지만, Elastase 활성이 저해되면 Elastase와 N-succinyl-(Ala) _{3}-P-nitroanilide의 효소-기질 복합체를 형성이 줄어들기 때문에 Elastase 활성이 저해되는 정도에 따라 점점 연해지면서 투명색을 띤다. 이때 감소하는 흡광도 값을 UV/Vis 분광광도계를 이용하여 405㎚에서 측정하여 Elastase inhibition assay (Elastase 저해 활성)을 평가한다.

2.2. 엘라스틴(Elastin)
엘라스틴은 콜라겐과 함께 결합조직에 존재하고 고무탄력성과 같은 신축성이 있는 단백질이며 조직의 유연성, 신축성에 관여하고 있다. 따라서 신축이 항상 반복되는 조직에는 함량이 많고, 특히 소의 항혁대에서는 건조중량 80% 이상으로 매우 많으며 탄력성이 필요없는 건에서는 0.3%로 적다.

참고 자료

생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 강영희