결과2_PCR A+ 결과레포트

목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험은 PCR 과정인 DNA의 변성, Primer의 결합, DNA의 신장을 이해한 것을 바탕으로 DNA를 PCR 과정을 통해 증폭시키고 전기 영동을 통해 결과를 확인해보는 실험이었다. 이번 실험에서는 pfu master mix, Nuclease free water, Forward primer, Reverse primer, DNA template를 레시피대로 넣어 PCR mixture을 만든 후에 PCR과 전기영동 과정을 진행하였고 결과를 확인하였다. 그 결과 원래의 예상했던 결과인 2.851kbp와 다소 차이가 있는 4kbp의 결과가 나왔다. 이 값을 통해 결과 값이 나온 이유를 고찰해보았다.

2. Experiment

(1) 아래의 레시피대로 PCR mixture를 만들었다. 이 때 시약은 넣은 순서대로 차례로 넣었으며 아주 미량이기 때문에 피펫팅에 유의하여야 한다. 따라서 완성된 PCR mixture는 부피가 아주 미량이기 때문에 벽에 맺힌 용액들이 있어 피펫팅과 함께 미니 원심분리기를 이용하여 잘 섞어 주었다.

Table 1. PCR mixture 레시피

Figure 1. Forward primer, Reverse primer
Figure 2. PCR mixture

(2) PCR Thermocycler의 온도를 아래의 표와 같이 설정하여 PCR을 진행하였다. 이때, 처음 94℃ 3min 과정은 supercoiled DNA를 풀어주기 위함이다.

참고 자료

송민동 외 10명, 분자생물학 입문, 월드사이언스, 2018, p68~75
강희규 외 8명, 진단분자생물학, 현문사, 2006, p180~196