선택배지와 PCR

목차

1. 실험제목

2. 실험목적 및 원리

3. 기기 및 시약

4. 실험방법

5. 실험결과

6. 실험고찰
가. 선택배지 & 분별배지
나. Staphylococcus aureus
다. Bacillus cereus
라. Listeria monocytogenes
마. Salmonella
바. Escherichia coli
사. PCR의 내용과 culture 법과의 비교
아. 실생활속 식품(계란)의 유통공정 과정중 균검사를 위해 사용된 경우. 또한 더 발전된 기술(논문인용)

7. 참고문헌 및 출처

본문내용

실험제목
선택배지와 PCR

실험목적 및 원리
식품 속에 존재하는 병원성 미생물을 선택배지를 사용하여 유해균을 판별한다.

기기 및 시약
6가지 선택배지(Mannitol Salt agar, Baird-Parker agar, Mannitol egg Yolk Polymyxin agar, Oxford agar, Salmonella-Shigella agar, Eosin Methylene Blue agar) , 오염된 우유 (선택배지를 통해서 어떤 균에 오염됬는지 확인하기 위한 우유)

실험방법
선택배지
1. 검출시험을 이용할 균들을 voltexing한다.
2. Staphylococcus areus 균을 알콜 살균을 거친 루프를 이용하여 MSA와 같은 살균과정을 거쳐 Baird-Parker에 도말한다.
3. Bacillus cereus 균을 알콜 살균을 거친 루프를 이용하여 MYP Agar에 도말한다.
4. Listeria monocytogenes 균을 알콜 살균을 거친 루프를 이용하여 Oxford agar에 도말한다.
5. Salmonella 균을 알콜 살균을 거친 루프를 이용하여 SS에 도말한다.
6. Escherichia coli 균을 알콜 살균을 거친 루프를 이용하여 EMB Agar에 도말한다.
7. 도말한 배지는 37℃에서 24hr를 배양한다.
8. 배양 후 형성된 colony를 관찰한다.

오염된 우유에 무슨 균이 있는지 확인하는 실험
1. 준비된 오염된 우유를 각각의 배지위에 도말한다. 총6개 배지위에 도말한다
2. 도말한 배지는 위에 실험한 배지와 같이 incuvator안에 37℃에서 24hr를 배양한다.
3. 배양 후 형성된 colony를 관찰한다. 그리고 어디 배지에 균이 자랐는지, 어떤균에 의해서 오염됬는지 확인한다.

실험결과
MSA배지속 Phenol Red 성분이 pH가 6.8이하라면 노란색, 8.2이상이면 분홍색이 된다. Mannitol분해 여부에 따라 S.aureus 감별을 하였다.

참고 자료

2013/Thosmas J. Montville 외 1인/ 2판/ 기초식품미생물학/월드사이언스/p15,16,97~105,123~131, 173~176,189~193,301
2015/송은 외 2인/초판/식품미생물학 및 실험/ 보문각/p331,341~343,348
2004/안병용 외 3인/2판/식품미생물학실험서/석학당/p142~154,203,204
2009.12/김동호 외 5명/PCR KIT와 선택배지를 이용한 계란의 병원성세균 검출 비교 평가/한국식품저장유통학회/p965-970